Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-KAT7 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O95251

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do KAT7

• A histona acetiltransferase KAT7 (também conhecida como HBO1, HBOa, MYST2) catalisa a acetilação da histona H3 na Lis-14 (H3K14ac) e da histona H4 na Lis-5, Lis-8 e Lis-12 (H4K5ac, H4K8ac, H4K12ac). A H3K14ac regula a transcrição gênica, a regulação imune, a manutenção de células-tronco e o desenvolvimento embrionário; a acetilação da H4 promove a licenciamento da replicação de DNA facilitando o carregamento cromossômico de complexos MCM. Referências relacionadas: PMID:16387653 PMID:21753189 PMID:24065767 PMID:10438470 PMID:19187766 PMID:20129055 PMID:11278932 PMID:18832067
• A H3K14ac mediada pelo KAT7 aumenta a processividade da RNA polimerase II durante a transcrição e é crucial para manter a alta expressão de HOXA9 e HOXA10 em células-tronco de leucemia mieloide aguda, apoiando a manutenção das células leucêmicas. Referências relacionadas: PMID:31827282
• Na hematopoiese, o KAT7 forma um complexo com BRD1/BRPF2 para direcionar a H3K14ac, o que é essencial para a diferenciação eritroide; a H3K14ac também é necessária para o desenvolvimento de células T. Referências relacionadas: PMID:21753189
• O KAT7 localiza-se nos centrômeros, onde medeia a acetilação de histonas para prevenir a inativação centrômerica mediada por SUV39H1 e atua como um regulador positivo da montagem de CENPA, garantindo a identidade do centrômero. Referências relacionadas: PMID:27270040
• Após danos ao DNA, o KAT7 é fosforilado pelo ATR e recrutado para lesões induzidas por UV, facilitando a acetilação de histonas e o recrutamento de XPC para uma reparação eficiente por excisão de nucleotídeos. Referências relacionadas: PMID:28719581
• O KAT7 inibe a sinalização NF-kappa-B de forma independente da sua atividade acetiltransferase, fornecendo uma função regulatória não catalítica em respostas imunes e inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:16997280
• A nível subcelular, o KAT7 é predominantemente nuclear, com enriquecimento nos cromossomos e centrômeros; também é detectado no citosol, sugerindo uma localização dinâmica.
• O KAT7 é ubiquamente expresso, com os níveis mais altos nos testículos, indicando um papel amplo, mas especializado, em diferentes tecidos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 55–193, uma região terminal N; considere validar a especificidade do anticorpo comparando sinais em lisados de células do tipo selvagem versus com knockdown de KAT7.
• Para Western blotting, espere uma banda próxima de 71 kDa; otimize o bloqueio (por exemplo, leite desnatado a 5%) e os controles de carregamento, e titule a diluição do anticorpo para o seu sistema de amostra.
• Em IHC-P, a recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor em tampão citrato) pode ser necessária; use seções de testículo como controle positivo devido à alta expressão de KAT7.
• Para IF/ICC, fixe e permeabilize as células adequadamente; a coloração nuclear e centrômerica do KAT7 pode ser confirmada com uma contracoloração de DNA (por exemplo, DAPI).
• Os ensaios de ELISA podem empregar o imunógeno recombinante como padrão para determinar a concentração ideal de revestimento e o título do anticorpo; a reatividade cruzada com ortólogos de camundongo e rato permite o desenvolvimento de ensaios multiespécies.

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