Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-KDM1 (LSD1) para WB, IHC-P - O60341

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do KDM1A

• KDM1A (também conhecido como LSD1, AOF2, BHC110) é uma desmetilase de histona específica de lisina dependente de FAD que remove marcas mono e dimetil da histona H3 na lisina 4 (H3K4me1/me2) e na lisina 9 (H3K9me1/me2). Dependendo do contexto do promotor, essa atividade pode levar à repressão ou ativação transcricional. Referências relacionadas: PMID:15620353, PMID:15811342, PMID:16079794
• A desmetilação de H3K4me em nucleossomos requer interação com o correpessor RCOR1/CoREST, ligando o KDM1A à regulação da expressão gênica neuronal e à função do complexo REST. Referências relacionadas: PMID:16079794, PMID:16140033, PMID:16885027
• Na presença do receptor de androgênio (AR), o KDM1A atua como um coativador desmetilando H3K9me, e essa função é modulada pela fosforilação da treonina 6 da histona H3 (H3T6ph) pela PRKCB. Referências relacionadas: PMID:16079795
• O KDM1A também desmetila substratos não-histona, incluindo a lisina 370 da p53 (prejudicando sua interação com 53BP1), a DNA metiltransferase 1 (DNMT1) e o fator de transcrição SOX2, influenciando assim a estabilidade e função das proteínas. Referências relacionadas: PMID:29691401, PMID:29358331
• Desempenha um papel crucial no desenvolvimento, sendo necessário para a gastrulação, e na hematopoiese, onde atua dentro de um complexo RCOR/GFI/KDM1A/HDAC para regular a diferenciação de células sanguíneas. Referências relacionadas: PMID:16079794, PMID:16140033
• O KDM1A facilita a transição epitélio-mesenquimal (EMT) cooperando com SNAI1 para reprimir marcadores epiteliais como E-caderina/CDH1, CDN7 e KRT8. Referências relacionadas: PMID:20562920, PMID:27292636, PMID:20389281
• Em neurônios, uma isoforma de KDM1A enriquecida no cérebro desmetila a lisina 20 da histona H4 (H4K20me1/me2) para regular a expressão gênica dependente de atividade, um processo essencial para o aprendizado espacial e memória. Referências relacionadas: PMID:26214369
• O KDM1A é predominantemente localizado no núcleo e é ubiquamente expresso, com expressão particularmente alta no cérebro e nos testículos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para análise por Western blot, o peso molecular previsto do KDM1A é de aproximadamente 93 kDa; considere o uso de marcadores de peso molecular apropriados e verifique a especificidade da banda com controles de knockdown ou knockout.
• O imunógeno corresponde aos resíduos 130–380 do KDM1A humano; realize o alinhamento de sequência para avaliar a homologia do alvo ao usar amostras de camundongo ou rato, pois a reatividade cruzada é indicada, mas pode variar dependendo da aplicação.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), cortes de tecido de cérebro ou testículos podem servir como controles positivos, dada a alta expressão de KDM1A; otimize a recuperação de antígeno e a diluição do anticorpo primário empiricamente.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), espere coloração nuclear; a fixação e permeabilização celular adequadas são críticas, e a coloração simultânea com um marcador nuclear é recomendada.
• Quando usado em ELISA, a inclusão de controles positivos e negativos é essencial para avaliar a especificidade e linearidade do anticorpo.

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