Anticorpo monoclonal de coelho anti-KDM4A para WB, IP, ELISA - O75164

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da KDM4A

• A desmetilase de lisina 4A específica (KDM4A), também conhecida como JMJD2A ou JHDM3A, é uma desmetilase de histonas que desmetila especificamente 'Lys-9' trimetilada (H3K9me3) e 'Lys-36' (H3K36me3) da histona H3, sem atividade sobre resíduos mono ou dimetilados nem sobre H3K4, H3K27 ou H4K20. Também desmetila a histona H1.4 em 'Lys-26' (H1.4K26me1/me2/me3).
  Referências relacionadas: PMID:16603238, PMID:26741168, PMID:21768309, PMID:19144645, PMID:30156264
• A KDM4A participa da repressão transcricional ao recrutar desacetilases de histonas (HDACs) e o correpressor NCOR1 para os promotores responsivos a E2F e ASCL2.
  Referências relacionadas: PMID:16024779
• Uma isoforma específica do músculo da KDM4A, que não possui o domínio desmetilase N-terminal, é fundamental para a diferenciação muscular; ela ativa a transcrição do gene Myog ao remover marcas repressivas da cromatina.
• A KDM4A está localizada no núcleo.
• A KDM4A é expressa de forma ubíqua nos tecidos humanos.
• A proteína pertence à família de desmetilação de histonas contendo o domínio JmjC e contém domínios dedos de zinco. Está sujeita a acetilação, fosforilação e ubiquitinação, e sua atividade envolve ferro e zinco como cofatores.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos resíduos 382-459 da KDM4A humana, localizados na região N-terminal. Verifique se o anticorpo detecta tanto as isoformas completas quanto as isoformas específicas do músculo que não possuem o domínio N-terminal, realizando testes em lisados celulares relevantes (por exemplo, mioblastos versus miotubos).
• Para Western blot, espera-se uma banda a aproximadamente 121 kDa para a KDM4A completa; valide utilizando extratos nucleares de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato.
• Otimize a diluição do anticorpo para cada aplicação (WB, IP, ELISA) utilizando amostras de controle positivo; realize experimentos de titulação para determinar a concentração de trabalho ideal.
• Para imunoprecipitação, considere métodos de ligação cruzada ou protocolos diretos com base no isotipo do anticorpo e na abundância do alvo.
• Inclua controles apropriados (por exemplo, controle de isotipo e lisados de knockout) para confirmar a especificidade.

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