Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-KDM4B/JMJD2B para WB, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - O94953

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do KDM4B

• KDM4B, também conhecido como JMJD2B ou JHDM3B, é uma desmetilase 4B específica de lisina e membro da família de desmetilases de histonas que contêm o domínio Jumonji C (JmjC) (gene KDM4B/JMJD2B). É uma enzima modificadora da cromatina que regula a transcrição ao remover grupos metil das histonas.
• Desmetila especificamente a lisina 9 trimetilada da histona H3 (H3K9me3), produzindo formaldeído e succinato no processo. Não atua sobre H3K4, H3K27, H3K36 ou H4K20. Comparado a outros membros da família KDM4 (KDM4A, KDM4C, KDM4D), KDM4B apresenta atividade catalítica mais fraca sobre H3K9me3. Referências relacionadas: PMID:16603238 PMID:28262558
• Desempenha um papel crítico no desenvolvimento do sistema nervoso central (SNC), conforme destacado pela sua implicação em funções neurológicas e associação a doenças.
• Se localiza predominantemente no núcleo, o que é consistente com sua função na modificação de histonas e regulação da cromatina.
• Contém múltiplos domínios conservados, incluindo JmjC, JmjN, dedos de zinco do tipo PHD e domínios TUDOR, que estão envolvidos na ligação à cromatina e na atividade catalítica. Requer ferro e zinco como cofatores para sua atividade de dioxigenase.
• Está sujeito a modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, que podem regular sua atividade ou interações. O splicing alternativo gera múltiplas isoformas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 50-150 da região N-terminal do KDM4B humano. Esta região é distinta do domínio catalítico JmjC, e o anticorpo pode reconhecer múltiplas isoformas que incluem essa sequência N-terminal.
• Para Western blotting, é esperada uma banda próxima a 122 kDa. Valide a especificidade usando lisados de controle positivo e negativo apropriados, e considere a possibilidade de detectar variantes de splicing alternativo.
• Para imunoprecipitação (IP) e imunoprecipitação da cromatina (ChIP), realize experimentos piloto para otimizar a concentração do anticorpo e as condições de reticulação. Use controles de isotipo de IgG e valide o enriquecimento nos loci alvo conhecidos de KDM4B.
• Em imunofluorescência (IF/ICC), verifique a localização nuclear; o anticorpo deve corar predominantemente o núcleo. A co-coloração com marcadores nucleares pode confirmar a especificidade.
• A reatividade cruzada é reportada para humano, camundongo e rato. Para outras espécies, confira a homologia de sequência na região do imunógeno antes do uso.

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