Anticorpo Policlonais Anti-KDM5A para WB, IP, ELISA, ChIP - P29375

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do KDM5A

• A desmetilase 5A específica de lisina (KDM5A), também conhecida como JARID1A, RBBP-2 ou RBP2, é uma desmetilase de histona que remove especificamente grupos metil da lisina 4 trimetilada e dimetilada da histona H3 (H3K4), desempenhando um papel fundamental na regulação da cromatina e na transcrição gênica.
• KDM5A desmetila especificamente H3K4me3 e H3K4me2, mas não a H3K4 monometilada, nem outros resíduos de lisina da histona (H3K9, H3K27, H3K36, H3K79, H4K20), contribuindo assim para a dinâmica do código das histonas.
• Ele regula a transcrição gênica ligando-se diretamente ao DNA no motivo 5'-CCGCCC-3', impactando a expressão de genes alvo a jusante. Referências relacionadas: PMID:18270511
• KDM5A está envolvido no controle transcricional das proteínas Hox durante a diferenciação celular, pode reprimir citocinas como CXCL12 e também regula o ritmo circadiano por meio de uma função coativadora independente de desmetilase com CLOCK-BMAL1. Referências relacionadas: PMID:19430464
• A proteína se localiza no núcleo e no nucléolo, o que é consistente com seu papel na modificação da cromatina e na regulação da transcrição.
• KDM5A foi relatado como um corepressor transcricional para certos genes (por exemplo, MT1F) e favorece a proliferação de células cancerosas, destacando sua potencial importância na oncologia. Referências relacionadas: PMID:27427228
• Como proteína contendo o domínio Jumonji/ARID, KDM5A pertence à família JARID de desmetilases de histona, que são caracterizadas por sua atividade de oxigenase que requer ferro e 2-oxoglutarato.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), dado o grande peso molecular do KDM5A (~192 kDa), utilize géis de acrilamida de baixa porcentagem e garanta uma transferência completa de proteína com buffers adequados e tempos de transferência estendidos.
• Na imunoprecipitação (IP), a natureza policlonal deste anticorpo pode aumentar a eficiência de captura, mas inclua controles de isotipo e valide a recuperação por detecção específica do alvo.
• Para imunoprecipitação de cromatina (ChIP), prevê-se que este anticorpo funcione com base no imunógeno recombinante de comprimento total; no entanto, é recomendado titular o anticorpo e confirmar o enriquecimento dos promotores alvo conhecidos de KDM5A no seu sistema experimental.
• Aplicações em ELISA podem requerer otimização do antígeno de revestimento e da diluição do anticorpo; considere utilizar o imunógeno recombinante como controle positivo.

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