Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-KEAP1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q14145

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do KEAP1

• O KEAP1 (proteína 1 associada ao ECH tipo Kelch), também conhecido como INrf2 ou KLHL19, funciona como um adaptador específico de substrato para o complexo de ubiquitina ligase E3 BCR (BTB-CUL3-RBX1). Referências relacionadas: PMID:14585973 PMID:15379550 PMID:15572695
• Atua como um sensor redox crítico, direcionando o fator de transcrição NFE2L2/NRF2 para ubiquitinação e degradação proteassomal em condições basais, mantendo assim níveis baixos de expressão de genes citoprotetores. Referências relacionadas: PMID:15601839 PMID:16006525
• Após estresse oxidativo ou eletrofílico, os resíduos de cisteína reativos no KEAP1 são modificados covalentemente, inativando o complexo ligase e permitindo que o NRF2 se acumule no núcleo e impulsione a expressão de enzimas de desintoxicação de fase II. Referências relacionadas: PMID:16006525 PMID:17127771 PMID:18251510
• Vias de autofagia seletiva envolvendo SQSTM1/p62 podem sequestrar o KEAP1, levando à ativação do NRF2; o complexo BCR(KEAP1) também ubiquitina a SQSTM1/p62, melhorando sua própria degradação. Referências relacionadas: PMID:20452972 PMID:28380357
• Substratos adicionais do complexo BCR(KEAP1) incluem BPTF e PGAM5, ampliando seu papel na regulação celular. Referências relacionadas: PMID:15379550 PMID:17046835
• O KEAP1 é predominantemente citoplasmático, mas também pode se localizar no núcleo, consistente com suas funções regulatórias.
• É amplamente expresso em tecidos humanos, com os níveis mais altos observados no músculo esquelético.
• Modificações pós-traducionais incluem S-nitrosilação e ubiquitinação, e contém domínios de repetição Kelch críticos para o reconhecimento do substrato.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, o peso molecular previsto do KEAP1 é de aproximadamente 70 kDa; use controles positivos apropriados de lisados de humano, camundongo ou rato para confirmar a especificidade.
• Em imunofluorescência/ICC, considere otimizar as condições de fixação e permeabilização para detectar os pools citoplasmáticos e nucleares do KEAP1.
• Para aplicações de ELISA sanduíche, recomenda-se o emparelhamento com um anticorpo de captura validado; valide o par de anticorpos na matriz de amostra relevante.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes pode variar; é aconselhável testar novos lotes em um experimento piloto antes de estudos em grande escala.

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