Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-KEAP1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14145

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do KEAP1

• O KEAP1 (proteína 1 associada ao ECH do tipo Kelch), também referido como INrf2 ou KLHL19, é uma proteína citoplasmática e nuclear de 70 kDa que funciona como um adaptador específico de substrato para o complexo de ubiquitina ligase E3 BCR (BTB-CUL3-RBX1).
• Em condições basais, o KEAP1 tem como alvo o fator de transcrição NFE2L2/NRF2 para ubiquitinação e degradação proteassomal, reprimindo assim a expressão de genes citoprotetores. Referências relacionadas: PMID:14585973 PMID:15379550 PMID:15572695 PMID:15601839 PMID:16006525
• Como um sensor chave de estresse oxidativo, o KEAP1 contém resíduos de cisteína altamente reativos que sofrem modificação covalente não enzimática por eletrófilos, levando à inativação do complexo ligase e ao subsequente acúmulo nuclear do NRF2. Referências relacionadas: PMID:16006525 PMID:17127771 PMID:18251510
• O KEAP1 também participa da autofagia seletiva através da interação com a SQSTM1/p62; isso sequestra o KEAP1 em corpos de inclusão, ativando ainda mais o NRF2, enquanto media simultaneamente a ubiquitinação e degradação da SQSTM1/p62. Referências relacionadas: PMID:20452972 PMID:28380357
• Substratos adicionais do complexo de ubiquitina ligase contendo KEAP1 incluem BPTF e PGAM5, destacando seus amplos papéis regulatórios. Referências relacionadas: PMID:15379550 PMID:17046835
• O KEAP1 é amplamente expresso em tecidos humanos, com os níveis mais altos encontrados no músculo esquelético; a proteína contém repetições de Kelch características e um domínio BTB, e está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo S-nitrosilação e ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 320–510 do KEAP1 humano; esta região pode permitir o reconhecimento do KEAP1 de comprimento total e potencialmente epítopos conservados entre espécies. Verifique a especificidade no seu sistema de amostra.
• Para Western blotting, espere uma banda correspondente ao peso molecular previsto de aproximadamente 70 kDa. Inclua controles positivos e negativos apropriados.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), o KEAP1 pode ser detectado em compartimentos citoplasmáticos e nucleares. Considere otimizar as etapas de fixação e permeabilização.
• A reatividade cruzada relatada inclui humano, camundongo e rato; no entanto, o desempenho em cada espécie deve ser validado com tecidos ou linhagens celulares relevantes.
• Para ELISA, o imunógeno de proteína recombinante sugere uso potencial em configurações de captura ou detecção; confirme a afinidade de ligação e especificidade com proteínas alvo e de controle.

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