Anticorpo Policlonal Anti-Ki67 para WB, IHC-P, ELISA - P46013

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Ki67

• O Ki67, codificado pelo gene MKI67, é uma proteína marcadora de proliferação bem estabelecida (também conhecida como Antígeno KI-67 ou Antígeno Ki67).
• Durante a mitose precoce, o Ki67 se localiza novamente dos nucléolos para a superfície dos cromossomos, formando estruturas estendidas semelhantes a escovas. Essas escovas altamente carregadas atuam como um surfactante, impedindo a agregação de cromossomos por meio de repulsão estérica e eletrostática. Referências relacionadas: PMID:27362226
• Na anáfase, o Ki67 alterna para um atraente de cromossomos, passando por desfosforilação e separação de fase líquido-líquido dependente de RNA para promover o agrupamento de cromossomos. Referências relacionadas: PMID:32879492, PMID:39153474, PMID:28935370
• O Ki67 liga-se ao DNA com preferência por sequências superenoveladas e ricas em AT, e também interage com RNAs ribossômicos prematuros durante a anáfase. Referências relacionadas: PMID:10878551, PMID:28935370
• Também pode contribuir para a organização da cromatina, embora o mecanismo direto permaneça pouco claro. Referências relacionadas: PMID:24867636
• O Ki67 localiza-se no nucléolo durante a interfase e na superfície dos cromossomos durante a mitose.
• A proteína está sujeita a várias modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação, formação de ligações isopeptídicas e conjugação de ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno recombinante cobre os aminoácidos 460-680 do Ki67 humano (NP_002408.3), o que pode influenciar a especificidade do epítopo. Considere isso ao projetar ensaios de detecção.
• Para western blot, observe o alto peso molecular (~359 kDa); use géis de SDS-PAGE com baixa porcentagem e tempos de transferência estendidos ou métodos de transferência úmida para garantir uma transferência eficiente.
• Para IHC-P, valide as condições de recuperação de antígeno e a diluição do anticorpo primário no sistema de amostra relevante. Inclua controles positivos (por exemplo, tecidos em proliferação) e negativos apropriados.
• Este anticorpo apresenta reatividade cruzada com camundongo, permitindo seu uso em estudos de xenotransplante ou modelos murinos; no entanto, verifique experimentalmente o desempenho específico da espécie.
• As aplicações de ELISA exigem otimização dos protocolos de revestimento e detecção.

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