Anti-Ki67 Rabbit PolymAb® (Validado para KO) para WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - E9PVX6

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Ki67

• MKI67 (Ki-67) é um marcador de proliferação bem estabelecido expresso no núcleo de células em divisão ativa, com níveis de expressão intimamente correlacionados com o ciclo celular.
• Associa-se aos cromossomos mitóticos durante a mitose precoce, formando uma estrutura característica semelhante a uma escova que atua como uma barreira estérica e eletrostática para evitar o agrupamento de cromossomos. Referências relacionadas: PMID:27362226
• A alta carga líquida do Ki67 contribui para suas propriedades semelhantes a surfactantes, dispersando os cromossomos e facilitando a motilidade independente. Referências relacionadas: PMID:27362226
• Na anáfase, o Ki67 alterna para um atrator de cromossomos, promovendo o agrupamento de cromossomos através da desfosforilação e separação de fase líquido-líquido dependente de RNA.
• Liga-se ao DNA, particularmente a sequências superenroladas e ricas em AT, e interage com RNAs ribossômicos prematuros para modular a organização cromossômica.
• O Ki67 localiza-se na superfície do cromossomo, nucléolo e núcleo. As modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação.
• A proteína tem um peso molecular previsto de ~350 kDa, com splicing alternativo levando a variantes de 359 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético dos aminoácidos 2271–2370; considere incluir lisados celulares KO positivos e negativos para validação em WB.
• Para WB, use um gel com baixa porcentagem (ex: 6–8%) e tempos de transferência estendidos devido ao grande tamanho da proteína (~350 kDa).
• Em IHC-P, a coloração nuclear de Ki67 requer recuperação eficaz de antígenio; o tampão citrato (pH 6,0) com calor é comumente usado.
• Para IF/ICC, recomenda-se uma etapa de permeabilização com 0,1–0,5% de Triton X-100 para acessar antígenos nucleares.
• Este anticorpo é validado para estudos de knockout; verifique a especificidade no seu sistema modelo comparando amostras de tipo selvagem e KO.

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