Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Kininogen 1 (KNG1) para WB, IF/ICC, ELISA - P01042

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Kininogen 1

• O Kininogen-1 (KNG1) é uma glicoproteína secretada que serve como precursora da bradicinina, um peptídeo vasoativo potente, e atua como um inibidor de proteases de tiol.
• Existem duas isoformas geradas por splicing alternativo: cininogênio de alto peso molecular (HMWK) e cininogênio de baixo peso molecular (LMWK). O HMWK desempenha um papel crítico na via intrínseca de coagulação sanguínea ao posicionar o pré-calicreína e o fator XI sobre o fator XII, enquanto o LMWK não está envolvido na coagulação.
• Após a clivagem pela calicreína plasmática, o HMWK libera bradicinina, que induz vasodilatação, hipotensão, aumento da permeabilidade vascular e dor; também estimula a liberação de outros mediadores inflamatórios.
• A bradicinina também exibe efeitos cardioprotetores, direta e indiretamente via fator relaxante derivado do endotélio, e influencia a contração do músculo liso, a natriurese e o metabolismo da glicose.
• Ambas as isoformas inibem a agregação plaquetária induzida por trombina e plasmina, contribuindo para a regulação hemostática.
• O KNG1 é secretado para o espaço extracelular e plasma; o T-quinina, um peptídeo relacionado, foi detectado em carcinomas malignos de ovário, cólon e mama, mas não em tumores benignos.
• As modificações pós-traducionais incluem hidroxilação, fosforilação e formação de ligações dissulfeto; também é um ácido pirrolidona carboxílico e uma glicoproteína.
• Mutações no KNG1 estão associadas ao angioedema hereditário tipo 6 (HAE6), uma doença caracterizada por episódios recorrentes de inchaço grave.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, uma diluição inicial de 1:500–1:2000 é comumente usada para anticorpos policlonais; otimize com base na sua amostra e sistema de detecção. O peso molecular esperado do KNG1 é de aproximadamente 72 kDa, embora a glicosilação possa resultar em uma massa aparente ligeiramente maior.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica, considere usar uma etapa de permeabilização para detectar cininogênio intracelular, pois a proteína é secretada e pode estar localizada em vesículas ou na superfície celular.
• Para ELISA, este anticorpo pode ser empregado como reagente de captura ou detecção; combine-o com um anticorpo pareado adequado para ELISA sanduíche ou use-o para medir diretamente os níveis de cininogênio no plasma ou meio condicionado.
• O imunógeno abrange os resíduos 148-427, que inclui o domínio da quinina; portanto, o anticorpo provavelmente reconhece ambas as isoformas HMWK e LMWK.
• Como com qualquer anticorpo policlonal, pode ocorrer variabilidade entre lotes; recomenda-se extensa validação no seu sistema experimental.

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