Anticorpo Policlonais Anti-KITLG para WB, IF/ICC, ELISA - P21583

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do KITLG

• O ligante de Kit (KITLG), também conhecido como fator de célula-tronco (SCF), fator de crescimento de mastócitos (MGF) e ligante de c-Kit, é uma citocina que atua como ligante para o receptor tirosina quinase KIT.
• O KITLG desempenha papéis essenciais na sobrevivência celular, proliferação, hematopoiese, manutenção de células-tronco, gametogênese, desenvolvimento de mastócitos, migração e melanogênese.
• Ao se ligar ao KIT, o KITLG ativa múltiplas vias de sinalização downstream, incluindo as vias PI3K-AKT, RAS-MAPK, JAK-STAT e PLCγ, coordenando uma ampla gama de respostas celulares.
• A proteína é expressa em forma ligada à membrana, localizada na membrana celular, citoplasma, citoesqueleto e projeções celulares como lamellipodia e filopodia, e também pode ser secretada como um fator solúvel.
• O KITLG é produzido como uma proteína transmembranar que sofre clivagem proteolítica para gerar um fator de crescimento solúvel, com peso molecular de aproximadamente 31 kDa (UniProt: 30,9 kDa).
• Ele atua sinergicamente com outras citocinas, particularmente interleucinas, para amplificar os resultados da sinalização em células hematopoiéticas e imunes.
• Clinicamente, mutações no KITLG estão associadas a distúrbios como a surdez não sindrômica autossômica dominante (DFNA69) e a síndrome de Waardenburg tipo 2, destacando seu papel no desenvolvimento de melanócitos e da cóclea.
• Palavras-chave indicam seu envolvimento em splicing alternativo, adesão celular e variantes de doenças, refletindo sua natureza multifuncional.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• A sequência do imunógeno (aa 120-190) está localizada dentro do domínio extracelular do KITLG; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça tanto a forma ligada à membrana quanto a solúvel, desde que o epítopo esteja acessível.
• Para Western blotting, uma banda em torno de 31 kDa é prevista; no entanto, devido à glicosilação e possível dimerização, o peso molecular observado pode variar; recomenda-se o uso de condições redutoras e controles apropriados.
• Para imunofluorescência/ICC, podem ser observadas marcações de membrana e intracelulares; a permeabilização é necessária para detectar pools citoplasmáticos.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; recomenda-se o pareamento com um anticorpo monoclonal que reconheça um epítopo distinto para o desenvolvimento de ELISA sanduíche.
• Reatividade cruzada com KITLG de camundongo e rato foi relatada; no entanto, valide em seu sistema de amostra específico, pois a homologia de sequência pode afetar a afinidade.
• Como o KITLG é secretado, os sobrenadantes de cultura celular ou amostras de soro podem exigir otimização para detecção.
• Use agentes de bloqueio apropriados para minimizar a ligação não específica, especialmente em tecidos ricos em mastócitos.

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