Anticorpo Policlonal Anti-Klotho para WB e ELISA - Q9UEF7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Klotho

• Klotho (KL) é uma proteína de membrana tipo I de passagem única, codificada pelo gene KL em humanos, e também existe como um peptídeo secretado gerado por clivagem proteolítica.
• Exibe atividade de beta-glucuronidase, capaz de hidrolisar esteroides beta-D-glucuronídeos como estradiol-3-beta-D-glucuronídeo, estrona-3-beta-D-glucuronídeo e estriol-3-beta-D-glucuronídeo.
• Klotho atua como um co-receptor obrigatório para FGF23, essencial para a ligação do fator de crescimento de fibroblastos 23 (FGF23) ao FGFR1 e para mediar o metabolismo renal da vitamina D e a reabsorção de fosfato regulados por FGF23.
• O ectodomínio solúvel de Klotho liberado funciona como um hormônio antienvelhecimento circulante que pode prolongar a vida útil ao inibir a sinalização de insulina/IGF1.
• A localização subcelular inclui a membrana celular apical (isoforma ligada à membrana) e secreção (isoforma solúvel), permitindo funções autócrinas, parácrinas e endócrinas.
• A expressão tecidual é mais alta no rim, placenta, intestino delgado e próstata; a Klotho solúvel está presente no soro e no líquido cefalorraquidiano e é regulada negativamente em certos cânceres e na doença renal crônica.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação, e a proteína é classificada nas famílias de glicosidases, hormônios e hidrolases.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno usado abrange a região N-terminal (aa 1–200) da Klotho humana, que é comum às isoformas de membrana e secretadas; considere isso ao projetar ensaios de detecção.
• Para Western blot (WB), a Klotho migra em torno de 116 kDa; inclua controles positivos de lisados de rim, placenta ou próstata (humano, camundongo ou rato), pois esses tecidos expressam a proteína.
• Ao realizar ELISA, valide a especificidade do anticorpo usando proteína Klotho recombinante ou fluidos biológicos onde a Klotho solúvel é abundante, como soro ou líquido cefalorraquidiano.
• A reatividade cruzada com Klotho de camundongo e rato é prevista; no entanto, alinhamento de sequência e testes piloto são recomendados para confirmar reatividade semelhante nessas espécies.
• Otimize a diluição do anticorpo e as condições de detecção para cada aplicação; as diluições iniciais típicas devem ser determinadas empiricamente.

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