Anticorpo Policlonal Anti-KLRK1 para WB, ELISA - P26718

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Antecedentes Biológicos: Função e Localização do KLRK1 (NKG2-D)

• O NKG2-D, codificado pelo gene KLRK1 (também designado D12S2489E, NKG2D), também é conhecido como recetor de lectina-like de células assassinas, subfamília K, membro 1, CD314, ou recetor de células NK D. É uma proteína integral de membrana do tipo II.
• Funciona como um recetor ativador e coestimulador fundamental para a imunovigilância. Reconhece ligantes induzíveis por stress relacionados com o MHC de classe I (por exemplo, MICA, MICB, ULBP1-6) em células tumorais e infectadas por vírus, desencadeando a citotoxicidade das células NK e a coestimulação das células T CD8+.
• A sinalização através do NKG2-D envolve o influxo de cálcio e leva à eliminação mediada por perforina das células alvo e à expressão de TNF-alfa.
• Localizado na membrana celular, é expresso principalmente em células natural killer (NK), células T alfa-beta CD8+, células T gama-delta e células dendríticas assassinas produtoras de interferão (IKDCs).
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação e formação de ligações dissulfeto. Contém uma âncora de sinal e uma única hélice transmembranar.
• Para além da imunidade antitumoral, o NKG2-D participa na rejeição de enxertos de medula óssea e pode regular a diferenciação e sobrevivência das células NK.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio (aminoácidos 77–216) corresponde ao domínio extracelular do KLRK1 humano, sugerindo o reconhecimento de múltiplos epítopos, o que pode aumentar a sensibilidade em WB e ELISA.
• Para WB, use condições redutoras e lisados de células inteiras de linhas de células NK humanas ou de ratos (por exemplo, NK-92). O peso molecular previsto é de ~25 kDa, mas a glicosilação pode causar um desvio para massas superiores; valide com um controlo positivo.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou deteção; no entanto, as concentrações de trabalho ideais devem ser determinadas experimentalmente. Valide a reatividade cruzada em amostras de ratos, pois o fornecedor relata reatividade com proteínas humanas e de ratos.
• É necessário um anticorpo secundário apropriado (anti-coelho) e uma solução de bloqueio. Evite ciclos de congelação-descongelação para manter a estabilidade.

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