Anticorpo policlonal de coelho anti-KLRK1 para IF/ICC e ELISA - P26718

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de KLRK1/NKG2D

• KLRK1 (também conhecido como NKG2D, CD314) codifica a proteína de membrana integral do tipo II NKG2-D, um membro da subfamília K dos receptores semelhantes a lectinas de células destruidoras. Atua como um receptor ativador e coestimulador central para a imunovigilância inata e adaptativa.
• Ao se ligar a ligantes relacionados ao MHC de classe I induzíveis por estresse (por exemplo, MICA/B, ULBP1-6) em células tumorais ou infectadas por vírus, o NKG2D fornece sinais estimuladores que desencadeiam o influxo de cálcio, culminando na expressão de TNF-alfa e na citotoxicidade mediada por perforina.
• Nas células exterminadoras naturais (NK), o NKG2D fornece sinais de ativação primária e coestimulação, enquanto nas células T CD8+ atua como um receptor coestimulador que amplifica as respostas adaptativas mediadas pelo TCR.
• O receptor é expresso essencialmente em todas as células NK CD56+CD3- do sangue periférico, bem como em células T CD8+ alfa-beta e gama-delta e em células dendríticas exterminadoras produtoras de interferon (IKDCs).
• Subcelularmente, o NKG2D está localizado na membrana celular como uma proteína transmembrana com topologia de âncora de sinal. Está sujeito à glicosilação e contém uma ponte dissulfeto em seu domínio extracelular de ligação ao ligante.
• Estudos estruturais (estrutura 3D) elucidaram a interface de ligação com os ligantes, e a proteína é um membro do proteoma de referência, com splicing alternativo gerando isoformas adicionais.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno foi um peptídeo sintético abrangendo os aminoácidos 50–150 de KLRK1 humano (NP_031386.2). Para um reconhecimento adequado, certifique-se de que o anticorpo seja aplicado a amostras nas quais a sequência-alvo esteja preservada e o epítopo esteja acessível (por exemplo, em condições não desnaturantes para IF/ICC).
• Valide o anticorpo em seu contexto celular específico usando controles positivos, como células NK ativadas por IL-2 ou linhagens de células T CD8+ conhecidas por expressar KLRK1. Para ELISA, considere combiná-lo com um anticorpo de captura caso esteja desenvolvendo um imunoensaio sanduíche.
• Embora não tenha sido testado aqui, KLRK1 é uma proteína transmembrana com um domínio extracelular de ligação ao ligante; considere protocolos de marcação da superfície celular que evitem a permeabilização para a detecção da membrana intacta em experimentos de citometria de fluxo.

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