Anticorpo Policlonal Anti-KMT2A (Validado por KO) para WB e ELISA - Q03164

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da KMT2A

• A Histona-lisina N-metiltransferase 2A (KMT2A), também conhecida como MLL, HRX ou ALL-1, é um membro da família Trithorax de reguladores de cromatina. Desempenha um papel essencial no desenvolvimento inicial e na hematopoiese através da metilação da histona H3K4 (PubMed:12453419, PubMed:15960975, PubMed:19187761). Referências relacionadas: PMID:12453419 PMID:15960975 PMID:19187761
• A KMT2A é a subunidade catalítica do complexo MLL1/MLL, que media tanto a metilação da H3K4 quanto a acetilação da H4K16, regulando assim a acessibilidade da cromatina em promotores de genes ativos.
• Ela se liga a elementos CpG não metilados em regiões promotoras e ajuda a manter seu estado não metilado. Esta atividade é necessária para a ativação transcricional de genes-alvo como HOXA9 (PubMed:20010842, PubMed:20677832). Referências relacionadas: PMID:20010842 PMID:20677832
• A KMT2A promove a apoptose induzida por PPP1R15A, destacando um papel na morte celular programada (PubMed:10490642). Referências relacionadas: PMID:10490642
• No relógio circadiano, a KMT2A estabelece um estado de cromatina permissivo através da metilação rítmica da H3K4, o que facilita o recrutamento de CLOCK-BMAL1 e a expressão gênica circadiana (Por similaridade).
• A proteína exibe atividade de auto-metilação na cisteína 3882 na ausência de substratos de histona (PubMed:24235145). Referências relacionadas: PMID:24235145
• A KMT2A está predominantemente localizada no núcleo e é expressa no coração, pulmão, cérebro e linfócitos T e B. É classificada como um proto-oncogene e está frequentemente envolvida em rearranjos cromossômicos associados a leucemias agudas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 752–949 do KMT2A humano, localizado na região N-terminal. Este anticorpo pode detectar a KMT2A de comprimento total, bem como fragmentos N-terminais ou proteínas de fusão derivadas de translocações cromossômicas, tornando-o potencialmente útil para estudar leucemias com rearranjo de MLL.
• Devido ao alto peso molecular da KMT2A (~432 kDa), considere usar géis de SDS-PAGE de baixa porcentagem (ex.: 6–8%) e tempos de transferência úmida prolongados (>4 horas a 30 V) para western blot. A coloração do gel com Coomassie após a transferência pode ajudar a confirmar a migração eficiente da proteína.
• Para western blot, valide o anticorpo em linhagens celulares ou amostras de tecido knockout (KO) para confirmar a especificidade, conforme indicado pelo status de validação por KO. Inclua controles positivos e negativos apropriados.
• Em aplicações de ELISA, a natureza policlonal do anticorpo fornece ampla cobertura de epítopos, mas pode exigir uma otimização cuidadosa do bloqueio e da lavagem para reduzir o fundo.

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