Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-[KO Validado] Calpaína 2 para WB, IHC-P, ELISA - P17655

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Calpaína-2

• A Calpaína-2, também conhecida como M-calpaína, é a grande subunidade catalítica da protease neutra ativada por cálcio calpaína-2, codificada pelo gene CAPN2. Pertence à família de peptidases C2 e funciona como um heterodímero com uma pequena subunidade regulatória.
• Como uma tiol-protease não lisossômica regulada por cálcio, catalisa a proteólise limitada de substratos envolvidos no remodelamento do citoesqueleto e na transdução de sinal, desempenhando um papel na migração, proliferação e diferenciação celular.
• A Calpaína-2 cliva proteoliticamente a miocilina (MYOC) no Arg-226, um evento de clivagem implicado na regulação da pressão intraocular (PubMed:17650508). Referências relacionadas: PMID:17650508
• Após estimulação neuronal, a calpaína-2 cliva a CPEB3, o que abole sua atividade repressora de tradução, permitindo assim a tradução dos mRNAs alvo da CPEB3 (Por similaridade).
• A localização subcelular é primariamente citoplasmática e associada à membrana celular, consistente com sua ativação e translocação dependentes de cálcio.
• A expressão tecidual é ubíqua, refletindo seu papel fundamental nos processos proteolíticos celulares em múltiplos órgãos e tipos celulares.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e clivagem autocatalítica, que regulam sua atividade e função. Contém domínios estruturais-chave como os domínios catalítico e de ligação ao cálcio da calpaína, e é classificada nas famílias de tiol protease e hidrolase.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi gerado usando uma proteína de fusão recombinante abrangendo os aminoácidos 350–680 da Calpaína-2 humana (NP_001739.2), uma região que cobre parte do domínio catalítico e o domínio de ligação ao cálcio tipo C2. Considere este desenho de imunógeno ao validar a reatividade no seu sistema modelo.
• Para aplicações de Western blot (WB), espere uma banda no peso molecular previsto de ~80 kDa. Observe que a calpaína-2 pode sofrer processamento autocatalítico, o que pode resultar em fragmentos adicionais de menor peso molecular.
• O anticorpo também é adequado para imuno-histoquímica (IHC-P) e ELISA. Ao realizar IHC, inclua controles apropriados e otimize as condições de recuperação de antígeno para os tecidos de interesse.
• Reatividade cruzada foi observada com amostras humanas, de camundongo e rato. Para outras espécies, verifique a homologia de sequência, particularmente na região do imunógeno, antes do uso.
• Como a atividade da calpaína-2 é dependente de cálcio, considere a concentração de cálcio nos seus tampões de lise e condições experimentais, pois isso pode afetar a autólise da protease e a disponibilidade do epítopo.

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