Anticorpo Policloonal de Coelho Anti-KRT81 para WB, ELISA - Q14533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do KRT81

• O KRT81, também conhecido como Queratina 81 (alias: HB1, K81, KRTHB1, MLN137), é uma queratina capilar do tipo II que pertence à família dos filamentos intermediários, caracterizada por domínios de enrolamento duplo (coiled-coil) e potencial para modificações de ligação isopeptídica e conjugação do tipo ubiquitina.
• Como componente estrutural, o KRT81 forma heterodímeros obrigatórios com queratinas capilares do tipo I, que se agregam em filamentos intermediários de queratina essenciais para a resistência mecânica e a integridade do eixo do cabelo. Referências relacionadas: PMID:10504448, PMID:9402962
• Ele é expresso em abundância no córtex em diferenciação de folículos pilosos em crescimento (fase anágena), especificamente nos queratinócitos do córtex capilar, e está ausente na bainha radicular interna e na medula. Referências relacionadas: PMID:11445569
• O KRT81 também é detectado em tecido linfonodal maligno associado ao carcinoma de mama, e palavras-chave do Uniprot associam-no a variantes de doenças, sugerindo papéis além da biologia capilar.
• A proteína tem um peso molecular previsto de aproximadamente 55kDa e é codificada pelo gene KRT81 (também citado como KRTHB1 ou MLN137).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 350–450 do KRT81 humano (NP_002272.2). Esta região C-terminal foi selecionada para evitar potencialmente reatividade cruzada com outras queratinas; no entanto, a homologia de sequência deve ser verificada em relação a queratinas tipo II relacionadas.
• Para Western blotting, espera-se uma banda única de aproximadamente 55kDa em lisados de folículos pilosos humanos ou extratos de tecido apropriados; o uso de condições redutoras pode auxiliar na solubilização dos filamentos de queratina. Valide com amostras de camundongo, pois a reatividade cruzada é indicada; a reatividade cruzada com outras espécies deve ser determinada empiricamente.
• Em ELISA, o anticorpo pode ser utilizado para detecção direta de antígeno; considere ensaios de competição com peptídeo para confirmar a especificidade, se necessário.
• Devido à insolubilidade das queratinas, inclua um tampão de amostra desnaturante e redutor durante a lise e considere a sonicação para liberar o KRT81 da rede de filamentos intermediários.

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