Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-KSR1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q8IVT5

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do KSR1

• KSR1 (Kinase suppressor of Ras 1) é uma proteína de andaime e uma provável serina/treonina proteína quinase que desempenha um papel central na cascata de sinalização MAPK.
• Faz parte de um complexo de sinalização multiproteico que promove a fosforilação dos membros da família Raf e a ativação das quinases MAPK a jusante.
• Atua como um ativador alostérico de BRAF dependente de MAP2K1/MEK1 e MAP2K2/MEK2; ao se ligar ao MEK, dimeriza com BRAF e estimula a fosforilação de MEK mediada por BRAF (PubMed:29433126). Referências relacionadas: PMID:29433126
• Promove a ativação de MAPK1/ERK2 e MAPK3/ERK1 em resposta à estimulação por EGF e cAMP.
• A localização subcelular inclui citoplasma, membrana celular, membrana de franjas (ruffles) e membrana do retículo endoplasmático, consistente com seus papéis dinâmicos de transdução de sinal.
• Contém um domínio dedo de zinco e exibe atividade de ligação a ATP; no entanto, sua atividade quinase intrínseca permanece disputada e pode depender do contexto.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e a proteína é regulada por fosforilação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 320–420) encontra-se fora do domínio quinase; a homologia de sequência com KSR1 de camundongo e rato suporta a reatividade cruzada, mas o alinhamento deve ser verificado para a região exata do epítopo.
• Para Western blot, espera-se uma banda próxima a 102 kDa; otimize as condições de lise e carregamento usando linhagens de células de controle positivo (por exemplo, HeLa, NIH/3T3).
• Em imunofluorescência/ICC, teste tanto a fixação com metanol quanto com formaldeído, pois o KSR1 se localiza nas franjas da membrana e no retículo endoplasmático; a permeabilização com Triton X-100 ou digitonina pode ser necessária.
• Para ELISA, considere o emparelhamento com um anticorpo de detecção contra um epítopo não sobreposto após validar a afinidade de ligação e a especificidade.

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