Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Ku70 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P12956

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Ku70

• O Ku70 (XRCC6) é uma proteína de ligação ao DNA fundamental que medeia o reparo de quebras de fita dupla de DNA (DSB) através da via clássica de junção de extremidades não homólogas (NHEJ). Ele forma um heterodímero com o Ku80 (XRCC5) para criar o complexo Ku, que reconhece e se liga especificamente às extremidades quebradas do DNA, servindo como andaime para recrutar fatores de reparo essenciais. (PubMed:11493912, PubMed:20493174, PubMed:33854234) Referências relacionadas: PMID:11493912, PMID:20493174, PMID:33854234
• A via NHEJ dependente de Ku é crítica para a recombinação V(D)J, o processo que gera diversidade de anticorpos e receptores de células T, destacando seu papel essencial na imunidade adaptativa. (PubMed:9742108) Referências relacionadas: PMID:9742108
• O Ku70 possui atividade liase de 5'-desoxirribose-5-fosfato (5'-dRP), que limpa sítios abásicos próximos aos DSBs para preparar as extremidades do DNA para a ligação. Estudos in vitro também sugerem uma atividade helicase de DNA 3'-5', embora sua relevância fisiológica permaneça pouco clara. (PubMed:20383123, PubMed:7957065) Referências relacionadas: PMID:20383123, PMID:7957065
• Além do reparo, o Ku70 contribui para a manutenção dos telômeros e atua como um cofator transcricional para vários fatores de transcrição, ligando o reparo do DNA a processos celulares mais amplos. (PubMed:29490055, PubMed:12145306, PubMed:8621488) Referências relacionadas: PMID:29490055, PMID:12145306, PMID:8621488
• O Ku70 desempenha um papel na imunidade antiviral inata montando o complexo HDP-RNP, que facilita a fosforilação do IRF3 e a ativação da via cGAS-STING. (PubMed:28712728) Referências relacionadas: PMID:28712728
• Também pode se ligar a RNAs celulares e recrutar o PRKDC para participar da biogênese do RNA ribossomal, indicando versatilidade funcional. (PubMed:32103174) Referências relacionadas: PMID:32103174
• O Ku70 regula negativamente a apoptose interagindo e sequestrando o BAX longe das mitocôndrias; também pode desubiquitinar o BAX. (PubMed:15023334, PubMed:18362350, PubMed:35545041) Referências relacionadas: PMID:15023334, PMID:18362350, PMID:35545041
• A nível subcelular, o Ku70 é principalmente nuclear e associado aos cromossomos, mas também pode ser encontrado no citoplasma sob certas condições, consistente com suas múltiplas funções.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 501-600 do Ku70 humano. Espera-se que esta região interna gere anticorpos que reconheçam a proteína nativa de comprimento total. Considere validar a especificidade do anticorpo usando lisados de células com knockdown ou knockout.
• Dadas as aplicações listadas (WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA), é aconselhável otimizar experimentalmente as diluições para cada ensaio. Para o Western blot, espera-se uma banda em torno de 70 kDa; o uso de condições redutoras é típico para este alvo.
• A reatividade cruzada com o Ku70 de camundongo e rato foi relatada; os usuários devem confirmar o desempenho em seus sistemas de amostra específicos. Para IHC e IF, devem ser testados protocolos apropriados de fixação e permeabilização.
• Como os anticorpos policlonais podem apresentar variações entre lotes, inclua controles positivos e negativos apropriados em todos os experimentos.

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