Anticorpo policlonal de coelho Anti-Lactil-Histona H4 (K5) (P62805) para WB, DB, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H4

A Histona H4 é um componente central do nucleossomo, que envolve e compacta o DNA na cromatina para regular o acesso para transcrição, reparo do DNA, replicação e estabilidade cromossômica. A modulação dinâmica da estrutura da cromatina é governada por um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (MPTs), denominadas coletivamente de "código das histonas". Referências relacionadas: UniProt P62805

A lactilação da histona H4 na lisina 5 (correspondente a K6 na numeração UniProt) foi identificada como uma marca epigenética nova que liga o metabolismo celular à regulação gênica. Essa modificação foi caracterizada em macrófagos e células tumorais, onde é induzida pelo acúmulo de lactato e contribui para a ativação de programas de expressão gênica reparadora PMID:31645732. Sítios adicionais de lactilação foram mapeados em K9, K13, K17, K32, K78 e K92, destacando o papel generalizado dessa acilação na sinalização da cromatina PMID:31645732, PMID:37720100.

A Histona H4 localiza-se principalmente no núcleo e está integrada aos cromossomos durante todo o ciclo celular. A H4 acetilada está enriquecida nos núcleos de espermátides em maturação UniProt P62805.

Além da lactilação, a histona H4 sofre modificações extensas e combinatórias, incluindo acetilação, metilação, fosforilação, crotonilação, succinilação e butirilação em múltiplos resíduos, cada uma contribuindo para estados de cromatina e resultados funcionais distintos. Sítios chave de modificação e suas enzimas modificadoras foram extensivamente catalogados. Referências relacionadas: PMID:17967882, PMID:2474456, PMID:7664735, PMID:21925322, PMID:22389435, PMID:27105113.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo lactilado sintético que compreende a lisina 5 da histona H4 humana. Para uma especificidade ideal, considere o uso de um peptídeo não lactilado ou controles de pré-adsorção no seu ensaio.
• Este anticorpo é indicado para Western blot (WB), dot blot (DB) e ELISA. Para WB, espera-se uma banda típica de aproximadamente 11 kDa. A detecção da histona H4 lactilada endógena pode exigir enriquecimento ou otimização das condições de lise devido à baixa estequiometria.
• A ampla reação cruzada prevista (Humano, Camundongo, Rato e outros) sugere sequências de epítopo conservadas entre espécies. Ainda assim, recomenda-se a validação específica por espécie.
• Ao usar este anticorpo em ELISA ou dot blot, confirme a eficiência de revestimento com antígenos lactilados de controle positivo e considere o bloqueio com BSA lactilado para reduzir o ruído de fundo.
• Para aplicações relacionadas à cromatina, protocolos de extração de histonas (extração ácida ou extração salina) são recomendados para enriquecer as histonas marcadas.
• Sempre valide o desempenho do anticorpo no sistema de amostra relevante, pois as modificações pós-traducionais dependem do contexto e podem variar conforme o tipo celular e o estado metabólico.

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