Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-LAG3 para WB e ELISA - P18627

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do LAG3

• A proteína 3 do gene de ativação de linfócitos (LAG3, CD223) é um receptor inibitório presente em células T ativadas por antígeno, que transmite sinais regulatórios negativos após a ligação ao ligante. Referências relacionadas: PMID:20421648, PMID:35761082, PMID:7805750
• Seu ligante principal é o MHC de classe II nas células apresentadoras de antígeno; ele também se liga à FGL1 secretada por hepatócitos e certas células tumorais. Referências relacionadas: PMID:30580966, PMID:32920841, PMID:35761082
• O LAG3 inibe a sinalização do receptor de célula T (TCR) ao interromper a associação entre CD3E e LCK, um processo que envolve a ubiquitinação do motivo KIEELE e a formação de condensados com a CD3E. Referências relacionadas: PMID:40101708, PMID:40592325
• Ele age em sinergia com o PD-1 para inibir a ativação de células T específicas de antígeno e regula negativamente a proliferação, ativação e homeostase tanto de células T CD8+ quanto CD4+. Referências relacionadas: PMID:20421648, PMID:7805750, PMID:8647185
• Nas células T regulatórias, o LAG3 contribui para sua função supressora, e também atua como regulador negativo da ativação de células dendríticas plasmocitóides (Por similaridade).
• A via inibitória do LAG3 é explorada por tumores para escapar da imunidade antitumoral; o bloqueio do LAG3 e do PD-1 pode reverter a exaustão de células T, fornecendo uma base racional para a imunoterapia contra o câncer. Referências relacionadas: PMID:35981087, PMID:40101708
• O LAG3 também pode funcionar como ligante para o MHC-II nas células apresentadoras de antígeno, promovendo a ativação/maturação das APC e induzindo uma resposta imune Th1.
• Subcelularmente, o LAG3 é encontrado na membrana celular e pode ser secretado; ele é expresso principalmente em células T ativadas e em um subconjunto de células NK. As principais características moleculares incluem domínios de imunoglobulina, pontes dissulfeto, glicosilação e ubiquitinação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região extracelular N-terminal (aa 29–170), que contém domínios do tipo Ig provavelmente envolvidos na ligação ao ligante; o anticorpo pode reconhecer o LAG3 nativo e recombinante.
• Para Western blot, é esperada uma banda próxima a 57 kDa; recomenda-se o uso de condições redutoras e a validação com lisados de células T ativadas ou linhagens celulares transfectadas com LAG3.
• Este anticorpo policlonal é adequado para ELISA; a titulação e o pareamento com um anticorpo de captura podem ser necessários para o desenvolvimento de ELISA sanduíche.
• A reatividade cruzada com o LAG3 de camundongo e rato foi observada; no entanto, recomenda-se o alinhamento de sequência e testes preliminares no modelo de espécie relevante.
• Como qualquer reagente policlonal, variabilidade entre lotes é possível; inclua controles positivos e negativos e considere um experimento piloto inicial para confirmar a reatividade no seu sistema de ensaio.

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