Anticorpo Monoclonal Anti-Lamina A/C para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P02545

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Lamin A/C

• Lamina A e C são componentes principais da lâmina nuclear, uma rede filamentosa subjacente à membrana nuclear interna, e são codificadas pelo gene LMNA através de splicing alternativo.
• Elas fornecem suporte estrutural para o envelope nuclear, conectam a cromatina ao envelope nuclear e regulam a montagem nuclear, a organização da cromatina e a dinâmica dos telômeros. Referências relacionadas: PMID:10080180, PMID:10580070, PMID:10587585
• As laminas desempenham papel na reparação do DNA: a Lamin A/C é recrutada para quebras de fita dupla do DNA por XRCC4 e IFFO1, imobilizando as extremidades quebradas do DNA para impedir translocações cromossômicas. Referências relacionadas: PMID:31548606
• A Lamin A/C regula a rigidez da matriz ao conferir propriedades mecânicas ao núcleo, influenciando a migração e a diferenciação celular. Referências relacionadas: PMID:23990565, PMID:25127216
• A localização subcelular inclui: lâmina nuclear, envelope nuclear, nucleoplasma, matriz nuclear e speckles nucleares.
• Modificações pós-traducionais como prenilação, metilação, fosforilação, acetilação e formação de ligação isopeptídica regulam a montagem e a função das laminas.
• De forma tecido-específica, a prelamina-A/C se acumula em células musculares lisas vasculares envelhecidas e em lesões ateroscleróticas, contribuindo para a senescência celular. Referências relacionadas: PMID:20458013
• Mutações no gene LMNA causam laminopatias, incluindo distrofia muscular de Emery-Dreifuss, cardiomiopatia dilatada, lipodistrofia e síndromes da progeria.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 403–572, correspondendo ao domínio da cauda C-terminal comum às laminas A e C, que é menos conservado entre as proteínas de filamento intermediário, indicando alta especificidade.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de ~74 kDa para a lamina A e ~65 kDa para a lamina C; ambas as bandas podem ser detectadas. Valide usando extratos nucleares de linhas celulares humanas, de camundongo ou de rato.
• Para IHC-P e IF/ICC, é esperada coloração do envelope nuclear e do nucleoplasma. A otimização da recuperação de antígeno e da permeabilização pode ser necessária para tecidos fixados em formalina.
• Para IP e ELISA, o anticorpo pode ser usado para enriquecer complexos de Lamin A/C; no entanto, as condições de bloqueio e lavagem devem ser determinadas empiricamente.
• Dada a validação por KO, este anticorpo é adequado para confirmar a depleção de Lamin A/C e estudar fenótipos de perda de função em ensaios de organização nuclear e reparação do DNA.

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