Anti-LC3A/LC3B Anticorpo Policlonal de Coelho para WB - Q9GZQ8/Q9H492

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do LC3A/LC3B

• A proteína 1 associada aos microtúbulos cadeia leve 3 beta (LC3B, também conhecida como ATG8F) é um modificador tipo ubiquitina que desempenha um papel central na autofagia, especificamente na formação de vacúolos autofágicos (autofagossomos). Referências relacionadas: PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329
• O LC3B é crítico para a mitofagia, um processo de autofagia seletiva que remove mitocôndrias danificadas; upon fissão mitocondrial e estresse celular, o LC3B liga-se a ceramidas C-18 para ancorar autofagolisossomos às membranas mitocondriais externas. Referências relacionadas: PMID:23209295, PMID:28017329, PMID:22922758
• O LC3B promove a ciliogênese primária removendo OFD1 dos satélites centriolares via via autofágica. Referências relacionadas: PMID:24089205
• Através da interação com o receptor de reticulofagia TEX264, o LC3B participa do remodelamento do retículo endoplasmático em autofagossomos durante o estresse nutricional, que subsequentemente se fundem com lisossomos para a renovação do RE. Referências relacionadas: PMID:31006537, PMID:31006538
• Sob estresse nutricional, o LC3B recruta diretamente o fator de nucleação de actina JMY para superfícies de membranas de forófagos, promovendo a nucleação de actina e a biogênese de autofagossomos. Referências relacionadas: PMID:30420355
• Subcelularmente, o LC3B é encontrado em membranas de autofagossomos, vesículas citoplasmáticas, o sistema de membranas internas, membranas mitocondriais e o citoesqueleto.
• O LC3B é expresso mais abundantemente no coração, cérebro, músculo esquelético e testículos, com pouca expressão no fígado.
• O LC3B é classificado sob a via de autofagia e conjugação tipo ubiquitina; existe como uma lipoproteína e fosfoproteína, destacando suas modificações regulatórias. Este anticorpo também reconhece o LC3A (MAP1LC3A), um parálogo intimamente relacionado com funções conservadas na autofagia.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético da extremidade N-terminal (aa 1-60) do LC3A humano, uma região altamente conservada com o LC3B. Espera-se reatividade cruzada com as formas LC3A e LC3B devido à homologia da sequência.
• No Western blotting, tanto a forma não lipidada (LC3-I) quanto a lipidada (LC3-II) podem ser detectadas; o LC3-II migra ligeiramente mais baixo (~14-16 kDa) no SDS-PAGE. Realize controles apropriados (por exemplo, indução de autofagia por privação ou inibidores) para distinguir as formas.
• Para aplicações de imunofluorescência, otimize as condições de fixação e permeabilização, pois o LC3 frequentemente decora estruturas autofágicas (puncta). A coloração simultânea com marcadores lisossomais pode ajudar a confirmar o fluxo autofágico.
• Na imuno-histoquímica, a recuperação de antígeno pode ser necessária devido à localização do epítopo. Valide a especificidade do anticorpo usando knockdown por si/shRNA ou peptídeo de bloqueio, quando viável.

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