Anticorpo Monoclonal Anti-LC3B para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q9GZQ8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de LC3B

• LC3B (cadeia leve 3 beta da proteína associada a microtúbulos) é um modificador do tipo ubiquitina essencial para a formação de autofagossomos, atuando como componente principal da maquinaria de autofagia. Referências relacionadas: PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329
• LC3B desempenha um papel crítico na mitofagia, ancorando autofagolisossomos a mitocôndrias danificadas por meio da ligação à ceramida C-18, regulando assim a qualidade mitocondrial e os níveis de ROS. Referências relacionadas: PMID:22922758, PMID:23209295, PMID:28017329
• Promove a ciliogênese primária mediando a remoção autofágica de OFD1 dos satélites centriolares. Referências relacionadas: PMID:24089205
• LC3B facilita a remodelação do retículo endoplasmático durante o estresse nutricional ao interagir com o receptor de reticulofagia TEX264, levando à ER-fagia. Referências relacionadas: PMID:31006537, PMID:31006538
• Após estresse nutricional, LC3B recruta JMY para as membranas do fagóforo, aumentando a nucleação de actina e a biogênese de autofagossomos. Referências relacionadas: PMID:30420355
• LC3B é expresso em maior abundância no coração, cérebro, músculo esquelético e testículo, com baixa expressão no fígado.
• Subcelularmente, LC3B se localiza nas membranas do autofagossomo, membranas mitocondriais e citoesqueleto, o que é consistente com seus papéis na autofagia e no tráfego celular.
• Como membro da família LC3/GABARAP, LC3B é conjugado à fosfatidiletanolamina durante a autofagia, um processo comumente monitorado como marcador de fluxo autofágico.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 2-107 da LC3B humana. Esta região N-terminal pode detectar tanto a forma não conjugada (LC3B-I) quanto a lipidada (LC3B-II); valide em sistemas de amostras relevantes.
• Para Western blot, pode ser observada uma banda próxima a 15 kDa (LC3B-II) e outra próxima a 18 kDa (LC3B-I); confira a mudança de peso molecular nas suas condições de ensaio.
• LC3B é um marcador característico de autofagia; use indutores conhecidos (jejum, rapamicina) e inibidores (cloroquina) para verificar a detecção do fluxo autofágico.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com humano, camundongo e rato; verifique outras espécies antes do uso.
• Na imunofluorescência, espera-se uma coloração punctiforme de LC3B após a indução da autofagia; faça a marcação dupla com marcadores lisossômicos para análise de colocalização.

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