Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-LCK para WB, IHC-P, ELISA - P06239

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do LCK

• LCK é uma tirosina quinase específica de linfócitos de 56 kDa (p56lck) e um membro da família Src. Contém domínios SH2 e SH3 e é ancorado à membrana plasmática via miristoilação e palmitoilação N-terminal.
• LCK está constitutivamente associado às caudas citoplasmáticas dos co-receptores CD4 e CD8. Após o engajamento do TCR, o LCK é recrutado para o complexo TCR-CD3, onde fosforila resíduos de tirosina dentro dos ITAMs das cadeias CD3 e TCRζ, iniciando a sinalização a jusante. Referências relacionadas: PMID:2470098, PMID:40592325
• Esta quinase fosforila e ativa o ZAP70, levando à ativação de linfócitos e produção de linfoquinas. O LCK também participa da sinalização do receptor de IL-2 e fosforila outros substratos, incluindo RUNX3, PTK2B e RHOH. Referências relacionadas: PMID:2470098
• LCK é expresso especificamente em células linfoides e está presente durante todo o desenvolvimento do timócito, regulando os pontos de verificação de maturação do pré-TCR e do TCR αβ maduro.
• Subcelularmente, o LCK localiza-se no lado citoplasmático da membrana celular e no citosol, onde está posicionado para interagir com receptores de superfície.
• Modificações pós-traducionais incluem âncoras lipídicas N-terminais (miristato e palmitato), múltiplos eventos de fosforilação (autofosforilação em Tyr394 e fosforilação inibitória em Tyr505 por CSK) e ubiquitinação. O splicing alternativo produz isoformas.
• LCK está implicado em doenças; rearranjos cromossômicos envolvendo LCK estão associados a linfomas de células T, e mutações na linhagem germinativa podem causar imunodeficiência combinada grave. Proteínas virais, como a Nef do HIV-1, têm como alvo o LCK para modular a função das células T.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 1-240) abrange os domínios únicos N-terminal e SH3, que são menos conservados entre os membros da família Src; este desenho pode aumentar a especificidade para o LCK.
• Para WB, espera-se uma banda em aproximadamente 56-58 kDa em lisados de células linfoides (por exemplo, Jurkat, PBMCs humanos, esplenócitos de camundongo). Otimize o preparo da amostra e a diluição do anticorpo para o seu sistema.
• Para IHC-P, pode ser necessário o recuperação antigênica; tecidos de controle positivo incluem timo humano ou linfonodo. Valide a coloração em amostras experimentais relevantes.
• O anticorpo reage de forma cruzada com LCK de camundongo e rato; se usar outras espécies, verifique a reatividade de forma independente.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser avaliada; é adequado para aplicações de ELISA quando emparelhado com anticorpos secundários apropriados.

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