Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-LDB3 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - O75112

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do LDB3

• LDB3 (também conhecido como ZASP ou Cypher) é uma proteína de ligação ao domínio LIM que funciona como um adaptador no músculo estriado para acoplar a sinalização mediada pela proteína quinase C através dos seus domínios LIM ao citoesqueleto.
• Localiza-se na linha Z sarcômera, onde interage com a α-actinina e outras proteínas do disco Z, desempenhando um papel crítico na montagem e manutenção das miofibrilas.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas que são expressas de forma diferenciada, contribuindo para a versatilidade estrutural e de sinalização da proteína.
• O LDB3 é predominantemente expresso no músculo esquelético, com menor expressão no coração, e níveis detectáveis no cérebro e na placenta.
• A proteína contém domínios LIM, um domínio PDZ e um motivo tipo ZASP, permitindo interações proteína-proteína e ligação de zinco.
• Mutações no LDB3 estão associadas a várias cardiomiopatias e miopatias, incluindo cardiomiopatia dilatada (CMD1C), cardiomiopatia hipertrófica (CMH24) e miopatia miofibrilar (MFM4), destacando a sua relevância clínica.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação e metilação, que podem regular a sua função e localização.
• O LDB3 também é encontrado em regiões perinucleares e pseudópodes, sugerindo potenciais papéis na sinalização celular e motilidade para além do sarcômero.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-283), sugerindo que o anticorpo pode reconhecer múltiplas isoformas de LDB3 que partilham esta sequência. Para a detecção específica de isoformas, valide com controlos positivos conhecidos.
• Para Western blotting, o tamanho esperado da banda é de aproximadamente 77 kDa (de acordo com o Peso da Proteína fornecido), mas a migração real pode variar devido ao splicing alternativo e modificações pós-traducionais. Use um marcador de peso molecular e compare com os tamanhos previstos.
• Em imunofluorescência (IF-P) e imuno-histoquímica (IHC-P), o LDB3 localiza-se nas linhas Z do músculo estriado, produzindo um padrão de coloração estriado característico. A contracoloração com faloidina pode ajudar a visualizar a organização sarcômera.
• Valide a reatividade cruzada em tecidos de camundongo e rato comparando com amostras humanas; podem ocorrer ligeiras variações na intensidade do sinal.
• Para ELISA, considere o uso de uma proteína recombinante LDB3 como padrão para avaliar a sensibilidade de ligação e a robustez do ensaio.

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