Anticorpo Policlonais Anti-LEF1 para WB, IP, IF-P, ELISA - Q9UJU2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da LEF1

• A LEF1 (Fator 1 de ligação ao intensificador linfoide) é um fator de transcrição de ligação a DNA sequência-específico que participa da via de sinalização Wnt. Referências relacionadas: PMID:2010090
• Ela ativa a transcrição de genes alvo na presença de CTNNB1 e EP300; as proteínas da família TLE (TLE1-4) reprimem a transativação mediada por LEF1/CTNNB1. Referências relacionadas: PMID:11266540
• A LEF1 regula a função do intensificador do receptor de célula T alfa e é necessária para a maturação de células T γδ que expressam IL17A por meio da modulação de BLK (por similaridade). Referências relacionadas: PMID:19653274
• Uma isoforma sem o domínio de interação com CTNNB1 pode atuar como antagonista da sinalização Wnt.
• No câncer pancreático, a LEF1 ativa transcricionalmente o MYC e o CCND1 para aumentar a proliferação, além de promover a migração reprimindo a E-caderina e ativando a fibronectina de forma independente de CTNNB1.
• A localização subcelular é predominantemente nuclear.
• Especificidade tecidual: detectada no timo; altamente expressa em biópsias e linhas celulares de câncer de cólon e pâncreas; fracamente expressa no tecido pancreático normal. As isoformas 1 e 5 são detectadas em linhas celulares pancreáticas.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, formação de ligação isopeptídica e conjugação com ubiquitina. Classificada como fator de transcrição de ligação a DNA com papéis na sinalização Wnt e displasia ectodérmica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre os aminoácidos 20–132 da LEF1 humana (NP_057353.1), uma região que compreende o domínio de ligação à β-catenina N-terminal; a natureza policlonal pode permitir o reconhecimento da LEF1 de comprimento completo e de isoformas que contêm essa região.
• Para Western blot, é esperada uma banda próxima a 44 kDa; valide o tamanho da banda no seu sistema de amostras, pois modificações pós-traducionais podem alterar a migração.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com humano, camundongo e rato; verifique a reatividade cruzada na sua matriz específica, pois a homologia de sequência na região do imunógeno influencia a detecção.
• As aplicações incluem WB, IP, IF-P (imunofluorescência em material paraffinizado) e ELISA; otimize as diluições e condições de forma empírica para cada ensaio.
• Como a LEF1 é um fator de transcrição nuclear, a extração nuclear ou a fixação com paraformaldeído pode melhorar a detecção em experimentos de IP e IF-P.

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