Anticorpo policlonal de coelho anti-leghemoglobina (MtLBs) para WB e ELISA - P27992/P27993

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Leghemoglobina

• Leghemoglobina 6 (também designada como leghemoglobina 2, MtLb2 ou MtLBs) é um membro da família das hemoglobinas vegetais expressa nos nódulos radiculares de Medicago truncatula.
• Atua como transportador de oxigênio, ligando O2 reversivelmente por meio de um ferro heme pentacoordenado, facilitando a difusão de oxigênio para os bacteroides e protegendo a nitrogenase da inativação (por similaridade).
• É essencial para a fixação simbiótica de nitrogênio (FSN); também tampona óxido nítrico e monóxido de carbono, e promove a produção de espécies reativas de oxigênio (por exemplo, H2O2) (por similaridade).
• Subcelularmente, localiza-se no citosol e no núcleo.
• A expressão tecidual específica é restrita aos nódulos radiculares.
• Palavras-chave associadas à proteína incluem: Citoplasma, Heme, Ferro, Ligação a metais, Nitração, Fixação de nitrogênio, Nodulação, Núcleo, Transporte de oxigênio, Fosfoproteína, Proteoma de referência, Transporte.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, considere usar um gel de SDS-PAGE a 15% para separar a leghemoglobina de ~15 kDa; inclua marcadores de peso molecular pré-coloridos para determinação precisa do tamanho.
• Otimize a diluição do anticorpo para cada aplicação: as diluições iniciais típicas para WB são de 1:500 a 1:2000; para ELISA, titule entre 0,1 e 2 µg/mL.
• Valide a especificidade usando proteínas recombinantes MtLb2 e MtLb6, pois a reatividade cruzada entre as isoformas da leghemoglobina (P27992/P27993) é possível.
• O imunógeno é composto por dois peptídeos sintéticos; o anticorpo pode detectar tanto a proteína nativa quanto a desnaturada, mas condições desnaturantes podem melhorar a acessibilidade ao epítopo.
• Para ELISA, use conjugados de peptídeo-BSA ou proteína purificada como antígeno de revestimento; bloqueie a ligação não específica com 5% de BSA ou leite desnatado.

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