Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Legumain (LGMN) para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q99538

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Legumain

• Legumain, também conhecida como endopeptidase asparaginil (AEP), é uma protease de cisteína com especificidade estrita para hidrólise de ligações asparaginil; também pode clivar lentamente ligações aspartil em condições ácidas. Referências relacionadas: PMID:23776206
• Desempenha um papel crítico na apresentação de antígenos de classe II do MHC, processando proteínas no sistema lisossomal/endossomal. Referências relacionadas: PMID:9872320
• Em células dendríticas de apresentação cruzada, a legumain media a apresentação de antígenos de classe I do MHC clivando e maturando a Perforina-2 (MPEG1), facilitando a translocação do antígeno para o citosol.
• A legumain é necessária para a degradação proteica lisossomal normal nos túbulos proximais renais e para a degradação do EGFR internalizado, regulando assim a proliferação celular.
• A proteína localiza-se predominantemente nos lisossomos e é expressa de forma ubíqua, com maior abundância no rim, coração e placenta.
• A legumain é sintetizada como um zimogênio, sofre ativação autoproteolítica e existe como múltiplas isoformas por meio de splicing alternativo; contém ligações dissulfeto e sítios de glicosilação ligados a N.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 26-288) corresponde à pró-forma da legumain sem o peptídeo sinal, portanto, o anticorpo pode reconhecer tanto a pró-forma (~49 kDa) quanto a enzima madura (~42 kDa) no Western blot.
• Para WB, considere carregar proteína suficiente e usar agentes de bloqueio apropriados, pois a legumain pode aparecer como um dupleto devido a diferenças de processamento ou glicosilação.
• Em IF-P e IHC-P, espere coloração pontilhada, lisossomal; inclua marcadores de organelas para verificar a localização.
• O anticorpo reage de forma cruzada com a legumain de camundongo e rato, permitindo estudos comparativos entre espécies; no entanto, valide em seu sistema de amostra, pois os níveis de expressão e o processamento podem variar.

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