Anticorpo policlonal anti-LGR5 para WB, FC, ELISA - O75473

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de LGR5

• LGR5 (receptor 5 acoplado à proteína G contendo repetições ricas em leucina), também denominado GPR49, GPR67, HG38, FEX ou GRP49, é um receptor de membrana multipassagem caracterizado por repetições ricas em leucina e um domínio com 7 segmentos transmembrana.
• Funciona como receptor das R-espondinas (RSPO1–4), potencializando a sinalização canônica de Wnt. Após a ligação do ligante, LGR5 associa-se aos receptores LRP6 e Frizzled fosforilados para ativar a expressão de genes-alvo de Wnt, sem interagir com proteínas G heterotriméricas.
• LGR5 é um marcador bem estabelecido de células-tronco adultas, particularmente na base das criptas intestinais e no bulge do folículo piloso, sendo essencial para a manutenção e o desenvolvimento dessas populações de células-tronco epiteliais.
• Subcelularmente, LGR5 está localizado na membrana celular, no aparelho de Golgi e na membrana da rede trans-Golgi.
• A expressão tecidual inclui músculo esquelético, placenta, medula espinhal e várias regiões do cérebro. No trato gastrointestinal, LGR5 é expresso especificamente nas células-tronco localizadas na base das criptas da mucosa do cólon e do intestino delgado. Em condições pré-malignas, sua expressão se estende além da base das criptas, e ele é superexpresso em cânceres de ovário, cólon e fígado.
• As modificações pós-traducionais incluem ligações dissulfeto e glicosilação. O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e a proteína contém um peptídeo-sinal para direcionamento à via de secreção.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo sintético da região C-terminal (aa 480–580) de LGR5 humano. No Western blot (WB), considere verificar a detecção da proteína de comprimento completo no peso molecular previsto de aproximadamente 100 kDa (99.998 Da calculados) sob condições redutoras.
• Para citometria de fluxo (FC), LGR5 é um receptor de superfície celular; utilize células intactas e não permeabilizadas para detectar a expressão na superfície. Confirme a marcação em linhagens celulares ou tecidos primários com expressão conhecida de LGR5 (por exemplo, organoides intestinais) e inclua controles de isotipo.
• Em aplicações de ELISA, este anticorpo policlonal pode ser utilizado como reagente de captura ou detecção. A reatividade cruzada com LGR5 de camundongo foi relatada; no entanto, recomenda-se a validação no formato específico do ensaio.
• O bloqueio com peptídeo ou linhagens celulares knockout podem ser utilizados como controles de especificidade para distinguir sinais específicos de sinais não específicos em todas as aplicações.

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