Anticorpo Policlonais de Coelho Anti-LIF para WB, ELISA - P09056

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do LIF

• O fator inibitório da leucemia (LIF), também conhecido como fator estimulador da diferenciação (fator D), é uma citocina secretada.
• O LIF exerce seus efeitos ao se ligar a um complexo receptor composto por IL6ST/gp130 e LIFR.
• Ele regula criticamente a auto-renovação, a diferenciação e a sobrevivência das células-tronco embrionárias (CTEs) e é essencial para a implantação embrionária. Referências relacionadas: PMID:1522892 PMID:16452727 PMID:26775702
• Após a ligação do ligante, o LIFR forma um heterodímero com IL6ST/gp130, ativando as quinases JAK (JAK1, JAK2, TYK2) que fosforilam os resíduos de tirosina do receptor, levando ao recrutamento e ativação de STAT3 (e STAT1). Referências relacionadas: PMID:8921810
• A estimulação por LIF também ativa as vias MAPK e PI3K/AKT; a atividade da PI3K é necessária para uma auto-renovação eficiente das CTEs, e a regulação da ERK é funcionalmente importante nesta resposta. Referências relacionadas: PMID:15328362 PMID:9545305
• O LIF induz a fosforilação de tirosina de PTPN11, que se associa ao complexo IL6ST/gp130-LIFR e recruta a subunidade p85 da PI3K, promovendo ainda mais a sinalização PI3K-AKT e GRB2-RAS-MAPK.
• A proteína madura é secretada por meio de um peptídeo sinal N-terminal clivado.
• O LIF é uma glicoproteína com pontes dissulfeto e pertence ao proteoma de referência.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos resíduos 24–203 do LIF de camundongo, cobrindo a proteína secretada madura; utilize-o para detectar o LIF nativo em sistemas de amostra como CTEs de camundongo ou tecido uterino.
• Para Western blot, execute as amostras em condições redutoras para resolver as formas ligadas por pontes dissulfeto; uma proteína LIF recombinante ou lisado de células que expressam LIF pode servir como controle positivo.
• No ELISA, considere emparelhar este anticorpo policlonal com um monoclonal correspondente ou outro policlonal como captura/detecção; valide a especificidade do ensaio com um padrão de LIF recombinante.
• Como qualquer anticorpo policlonal, a consistência entre lotes pode variar; recomendamos incluir um padrão de referência interno em cada experimento.
• Certifique-se de que os conjugados secundários de IgG anti-coelho são compatíveis com o seu sistema de detecção.

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