Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-LIN28A para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9H9Z2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do LIN28A

• LIN28A (Proteína homóloga A da lin-28, também conhecida como ZCCHC1) é uma proteína de ligação a RNA conservada, caracterizada por dois domínios de choque frio e dois motivos de dedo de zinco CCHC, o que a coloca na família das proteínas de dedo de zinco.
• Ela atua como supressora da biogênese de microRNA, ligando especificamente os pré-miRNAs pre-let-7 e outros pré-miRNAs em um motivo de loop terminal 5'-GGAG-3', recrutando assim as uridililtransferases TUT4 e TUT7. A uridilação desencadeia a degradação e impede o processamento pela Dicer, sendo crucial para a manutenção da pluripotência (PubMed:18951094, PubMed:19703396, PubMed:22118463). Referências relacionadas: PMID:18951094 PMID:19703396 PMID:22118463
• O LIN28A atua como potenciador da tradução, direcionando mRNAs específicos (por exemplo, IGF2, MYOD1) para polissomos, aumentando a síntese proteica e a estabilidade do mRNA, o que é essencial para a diferenciação do músculo esquelético (PubMed:21247876). Referências relacionadas: PMID:21247876
• Ele se localiza em vários compartimentos subcelulares: citoplasma, retículo endoplasmático rugoso, corpos P, grânulos de estresse e nucléolo, o que reflete seus papéis diversificados no metabolismo do RNA.
• O LIN28A é altamente expresso em células-tronco embrionárias, placenta e testículo, e é frequentemente up-regulado em tumores de mama com superexpressão de HER2, ligando-o à pluripotência e oncogênese.
• As modificações pós-traducionais do LIN28A incluem acetilação e fosforilação, que podem regular sua atividade e interações proteicas.
• Além disso, o LIN28A se liga e aumenta a tradução de mRNAs que codificam enzimas metabólicas como PFKP, PDHA1 e SDHA, aumentando assim a glicólise e a fosforilação oxidativa para apoiar a reparação tecidual.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético mapeado para os aminoácidos 100–209 do LIN28A humano. Dada a alta conservação da sequência, espera-se reatividade cruzada com o LIN28A de camundongo, o que é consistente com a reatividade documentada do produto.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de ~23 kDa; use porcentagens de gel apropriadas (por exemplo, SDS-PAGE a 12–15%) e inclua controles de carregamento relevantes.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), valide o anticorpo em tecidos ou linhagens celulares que expressam LIN28A (por exemplo, células-tronco embrionárias, testículo). As condições de recuperação de antígeno e as diluições do anticorpo devem ser otimizadas empiricamente.
• Devido à sua multilocalização, a IF/ICC pode revelar padrões de coloração citoplasmática e nucleolar; recomenda-se a co-coloração com marcadores de organelas para confirmar a especificidade.
• Como anticorpo policlonado, a consistência entre lotes deve ser verificada para ensaios quantitativos; considere incluir controles positivos e negativos em cada experimento.

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