Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-LIN28B para WB, IP, IHC-P, ELISA - Q6ZN17

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do LIN28B

• O LIN28B atua como um supressor da biogênese de microRNA, visando especificamente os miRNAs da família let-7. Ele se liga aos transcritos primários let-7 (pri-let-7) e os sequestra no nucléolo, protegendo-os do complexo microprocessador e impedindo sua maturação (PubMed:22118463).
  Referências relacionadas:
  PMID:22118463
• Essa repressão da expressão do let-7 é crítica para o desenvolvimento normal e ajuda a manter a pluripotência em células-tronco embrionárias, inibindo sinais de diferenciação.
  Referências relacionadas:
  PMID:22118463
• Após superexpressão, o LIN28B pode recrutar a uridililtransferase ZCCHC11/TUT4 para os transcritos pre-let-7, levando à uridilação terminal e degradação dos precursores do miRNA (PubMed:19703396).
  Referências relacionadas:
  PMID:19703396
• A proteína contém dois domínios de dedo de zinco e um domínio de choque frio, classificando-a como uma proteína de ligação a RNA envolvida no silenciamento gênico mediado por RNA.
• O LIN28B está predominantemente localizado no nucléolo e no núcleo, mas também pode se deslocar para o citoplasma, o que é essencial para sua função no processamento de miRNA.
• A análise da expressão tecidual revela altos níveis na placenta, com menor expressão no testículo e fígado fetal. Padrões distintos de expressão de isoformas são observados no carcinoma hepatocelular.
• O gene sofre splicing alternativo, produzindo pelo menos duas isoformas—a isoforma 1 promove o crescimento celular, enquanto a isoforma 2 não, sugerindo divergência funcional.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, e a proteína é identificada como um marcador proteômico; também apresenta uma entrada de estrutura 3D.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno para este anticorpo abrange os aminoácidos 1-163 do LIN28B humano, visando a região N-terminal. Esta região inclui o domínio de choque frio e é conservada entre as isoformas relatadas, potencialmente permitindo a detecção tanto da isoforma 1 quanto da isoforma 2. No entanto, a validação no sistema de amostra específico é recomendada.
• Para Western blot (WB), é esperada uma banda de aproximadamente 27 kDa. Garanta a extração adequada de proteínas, pois o LIN28B é predominantemente nuclear e nucleolar; considere o uso de tampão RIPA ou kits de extração nuclear para melhorar a solubilidade.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), espere padrões de coloração nuclear e nucleolar. Use métodos apropriados de recuperação de antígeno e valide a coloração com tecidos de controle positivo, como placenta ou tecidos cancerosos onde o LIN28B é altamente expresso.
• Para imunoprecipitação (IP), o formato monoclonal de coelho proporciona alta especificidade e afinidade. Otimize a concentração do anticorpo e as condições de incubação para a linhagem celular ou lisado tecidual alvo.
• Este anticorpo é validado para amostras humanas; reatividade cruzada com outras espécies não foi relatada. Pesquisadores devem verificar a reatividade se usarem espécimes não humanos.

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