Anticorpo policlonal anti-macroH2A.1 para WB, IF/ICC, ELISA - O75367

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da macroH2A.1

• A histona central macro-H2A.1 é uma variante da histona H2A que substitui a H2A convencional em um subconjunto de nucleossomos, onde reprime a transcrição. Os nucleossomos compactam o DNA e regulam sua acessibilidade para processos como reparo e replicação do DNA. Referências relacionadas: PMID:12718888, PMID:15621527, PMID:16428466, PMID:15897469
• Está envolvida na inativação estável do cromossomo X, inibindo a ligação de fatores de transcrição, incluindo NF-kappa-B, e interferindo nos complexos de remodelamento SWI/SNF. Referências relacionadas: PMID:12718888, PMID:16428466
• Inibe a acetilação de histonas por EP300 e recruta HDACs de classe I, levando a um estado de cromatina hipoacetilado. Referências relacionadas: PMID:16107708, PMID:16428466
• Uma isoforma liga-se especificamente a poli-ADP-ribose e O-acetil-ADP-ribose, desempenhando um papel fundamental no metabolismo de NAD+ ao bloquear as cadeias de PAR e limitar o consumo de NAD+, promovendo assim a respiração mitocondrial. Referências relacionadas: PMID:15902274, PMID:23022728
• Outra isoforma não se liga à poli-ADP-ribose e, em vez disso, reprime a expressão do gene SOD3. Referências relacionadas: PMID:15902274, PMID:23022728
• Localiza-se no núcleo e nos cromossomos.
• Está sujeita a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, metilação, fosforilação e ubiquitinação, que regulam suas funções.
• É amplamente expressa nos tecidos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 123–372 da macroH2A.1 humana, incluindo regiões comuns às duas principais isoformas; o anticorpo policlonal pode reconhecer múltiplas variantes de splicing. Valide a reatividade cruzada entre espécies no seu sistema de amostra, pois as sequências podem variar.
• Para Western blot (WB), espere uma banda em torno de 39 kDa; modificações pós-traducionais ou diferenças entre isoformas podem resultar em múltiplas bandas ou bandas deslocadas. Otimize o bloqueio e a diluição do anticorpo para o seu lisado específico.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), prevê-se um padrão de coloração predominantemente nuclear. Utilize protocolos adequados de fixação e permeabilização para preservar os epítopos nucleares.
• Para ELISA, considere a combinação com um anticorpo de detecção compatível ao desenvolver um ensaio sanduíche; a natureza policlonal pode oferecer alta sensibilidade, mas requer titulação cuidadosa.
• O anticorpo foi validado pelo fornecedor para WB, IF/ICC e ELISA com amostras humanas, de camundongo e de rato; os pesquisadores devem realizar uma validação independente para sua aplicação específica.

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