Anticorpo Policlonal Anti-MAdCAM-1 para WB, ELISA - Q61826

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MAdCAM-1

• O MAdCAM-1 (Mucosal addressin cell adhesion molecule 1) é um receptor de adesão celular expresso por vênulas mucosas, desempenhando um papel central na direção do tráfego de linfócitos para tecidos mucosos, como as placas de Peyer e a lâmina própria intestinal.
• Liga-se tanto à integrina alfa-4/beta-7 quanto à L-selectina, regulando assim a passagem e retenção de leucócitos dentro dos locais mucosos.
• Existem duas isoformas devido ao splicing alternativo; ambas aderem à integrina alfa-4/beta-7, mas a isoforma 2 carece do domínio tipo mucina e pode especializar-se no fortalecimento da adesão dependente de integrina, independente da ligação à L-selectina.
• A proteína é localizada na membrana e é altamente expressa em vênulas endoteliais altas (HEV) de tecidos linfoides intestinais organizados, com níveis mais baixos no baço, linfonodos periféricos e glândula mamária lactante.
• O MAdCAM-1 não é detectado no fígado, rim, pulmão ou cérebro normal, mas é regulado positivamente em tecidos cronicamente inflamados, incluindo pâncreas inflamado e células de endotelioma cerebral.
• Pertence à superfamília das imunoglobulinas e sofre modificações pós-traducionais, como glicosilação e formação de ligações dissulfeto, contribuindo para suas funções de adesão.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 22–109 do MAdCAM-1 de camundongo, cobrindo parte do domínio extracelular; o epítopo pode estar exposto na forma nativa ou desnaturada.
• Para Western blot, considere o uso de extratos proteicos de tecidos linfoides intestinais de camundongo ou baço, onde o MAdCAM-1 é enriquecido; uma banda próxima a 43 kDa é esperada.
• Como o anticorpo é policlonal e existem múltiplas isoformas, bandas adicionais de tamanhos diferentes podem ser detectadas; valide a especificidade da isoforma no seu sistema de amostra.
• Para ELISA, a proteína recombinante MAdCAM-1 ou lisados de tecidos podem ser usados; inclua controles apropriados para confirmar a especificidade da ligação.
• Otimize a diluição do anticorpo primário com base no sistema de detecção e abundância da amostra; a faixa inicial típica para WB é de 1:500–1:2000.

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