Anticorpo Policlonal Anti-MAP1LC3A para WB, IHC-P, ELISA - Q9H492

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MAP1LC3A

• O MAP1LC3A é um modificador tipo ubiquitina essencial para a macroautofagia, participando do alongamento da membrana do forófago durante a formação do autofagossomo.
  Referências relacionadas: PMID:20713600, PMID:24290141
• Através da sua interação com o receptor de reticulofagia TEX264, o MAP1LC3A impulsiona a remodelação de subdomínios do retículo endoplasmático em autofagossomos sob estresse nutricional, facilitando a renovação do RE via degradação lisossomal.
  Referências relacionadas: PMID:31006537, PMID:31006538
• Pertence à família ATG8 e também é conhecido como proteína relacionada com a autofagia LC3 A, proteína tipo cadeia leve 3 do MAP1 ou proteína de cadeia leve 3A das proteínas associadas aos microtúbulos 1A/1B (MAP1A/MAP1B LC3 A).
• A proteína localiza-se principalmente em vesículas citoplasmáticas, membranas de autofagossomos, o sistema de membranas internas e o citoesqueleto, consistente com o seu papel no tráfego vesicular e autofagia.
• O MAP1LC3A é processado pós-traducionalmente para expor uma glicina C-terminal para conjugação com fosfatidiletanolamina (lipidação), e é regulado por fosforilação, refletindo a sua classificação como lipoproteína e fosfoproteína.
• A expressão tecidual é mais alta no coração, cérebro, fígado, músculo esquelético e testículos, enquanto está ausente no timo e leucócitos de sangue periférico.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e a proteína faz parte da via de conjugação tipo ubiquitina (conjugação Ubl) crítica para a dinâmica da membrana autofagossomal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), note que o MAP1LC3A endógeno pode ser detectado como uma forma não processada de ~14 kDa e uma forma lipidada de ~16 kDa; considere otimizar o tampão de lise, inibidores de proteases e condições do gel para resolver ambas as espécies.
• Ao realizar imuno-histoquímica (IHC-P), valide os protocolos de fixação e métodos de recuperação de antígenio para o seu tipo de tecido; os controles positivos devem incluir tecidos ricos em autofagia, como coração, cérebro ou fígado.
• Para aplicações de ELISA, titule o anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal para configurações de captura ou detecção, e avalie a reatividade cruzada com membros da família LC3 intimamente relacionados, se necessário.
• Dada a reatividade cruzada do anticorpo com camundongo e rato (conforme especificado), ele pode ser usado em estudos de modelos roedores; no entanto, verifique o desempenho específico da espécie no seu sistema experimental.

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