Anticorpo Policlonal Anti-MAP1LC3B para WB, ELISA - Q9GZQ8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MAP1LC3B

• O MAP1LC3B é um modificador semelhante à ubiquitina que se conjuga às membranas autofagossômicas, promovendo o alongamento da membrana do fagóforo durante a formação do autofagossomo. Referências relacionadas: PMID:20418806 PMID:23209295 PMID:28017329
• Desempenha um papel crítico na mitofagia ao ancorar autofagolisossomos às membranas mitocondriais externas via ligação a ceramidas C-18, facilitando a eliminação de mitocôndrias danificadas e regulando a qualidade mitocondrial. Referências relacionadas: PMID:22922758 PMID:23209295 PMID:28017329
• Envolvido em vias de autofagia seletiva, incluindo ER-fagia, onde interage com o receptor de reticulofagia TEX264 para remodelar subdomínios do RE em autofagossomos sob estresse nutricional. Referências relacionadas: PMID:31006537 PMID:31006538
• Promove a ciliogênese primária removendo OFD1 dos satélites centriolares via via autofágica. Referências relacionadas: PMID:24089205
• Recruta o cofator JMY para as membranas do fagóforo, estimulando a nucleação de actina para apoiar a biogênese do autofagossomo. Referências relacionadas: PMID:30420355
• Localiza-se nas membranas do autofagossomo, membranas mitocondriais e no citoesqueleto, consistente com seu papel no tráfego de membranas e autofagia.
• Mais abundante no coração, cérebro, músculo esquelético e testículo, com baixa expressão no fígado.
• Processado e lipidado via uma via de conjugação semelhante à ubiquitina, ligando-se à fosfatidiletanolamina nos autofagossomos em formação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde à região N-terminal (aa 1-50) do MAP1LC3B humano. Para WB, o anticorpo pode detectar formas de comprimento total e potencialmente formas processadas no N-terminal; valide os padrões de clivagem em amostras de autofagia induzida vs. não induzida.
• Em condições redutoras, espere uma banda principal em ~14 kDa (LC3-I) e uma banda de migração mais rápida correspondente ao LC3-II lipidado; considere o uso de inibidores de autofagia (por exemplo, cloroquina) para distingui-las.
• Para aplicações de ELISA, teste com proteína ou peptídeo recombinante MAP1LC3B como controle positivo; avalie a reatividade cruzada com outros membros da família LC3 se a especificidade for crítica.
• Otimize a diluição do anticorpo e as condições de bloqueio usando lisados de tecido ou células de origem humana ou de rato, com base na reatividade cruzada relatada.
• A inclusão de controles positivos e negativos de autofagia (por exemplo, tratamento com rapamicina, células knockout ATG5) é recomendada para confirmar a detecção autêntica de LC3-II.

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