Anticorpo Policlonel de Coelho Anti-MAPK1/MAPK3 para WB, IF/ICC, ELISA - P28482 / P27361

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de MAPK1/MAPK3

• MAPK1 (ERK2, p42-MAPK) e MAPK3 (ERK1, p44-MAPK) são as duas quinases prototípicas ativadas por mitógenos (MAPK) que constituem o núcleo da cascata de sinalização conservada MAPK/ERK.
• Após ativação, MAPK1/3 fosforilam uma ampla gama de substratos nucleares e citoplasmáticos — incluindo fatores de transcrição (ex: ELK1, FOS), proteínas do citoesqueleto e outras quinases — para regular o crescimento celular, proliferação, diferenciação, adesão e sobrevivência.
• MAPK1 fosforila especificamente GLI1 em resposta à sinalização por smoothened, promovendo a dissociação de GLI1 de SUFU e sua translocação nuclear, regulando positivamente a via Hedgehog. Referências relacionadas: PMID:35831023
• Em condições de hipóxia, MAPK1 fosforila a fosfoglicerato quinase PGK1, direcionando-a para as mitocôndrias e suprimindo a produção de acetil-coenzima A a partir do piruvato. Referências relacionadas: PMID:26942675
• A quinase realiza transporte entre o citoplasma e o núcleo, localizando-se em adesões focais, caveolas, citoesqueleto (incluindo centrossomos e fusos) e estruturas associadas à membrana dependendo do contexto celular.
• A atividade quinásica de MAPK1 é rigorosamente regulada por eventos de fosforilação e desfosforilação; ela atua como um centro de propagação de sinais, fosforilando por sua vez quinases a jusante como RSK, MSK, MNK e quinases MAPKAP.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação ativadora em resíduos de Thr e Tyr na alça de ativação, acetilação e ubiquitinação, que modulam sua estabilidade, localização e parceiros de interação.
• A eliminação do gene ou a expressão e sinalização aberrante de MAPK1/3 está implicada em câncer, distúrbios neurológicos e outras doenças; a quinase é alvo de interações hospedeiro-vírus.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo policlonel de coelho foi desenvolvido contra um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 200-300 de MAPK1 e MAPK3 humanos (ERK2 e ERK1); ele é previsto para reconhecer ambas as quinases e pode detectar múltiplas bandas em western blot devido às isoformas e formas fosforiladas.
• Para western blotting, carregue 20-30 µg de lisado de proteína total e use controles apropriados (ex: células privadas de soro vs. células estimuladas por fator de crescimento) para observar a ativação de ERK. Os pesos moleculares esperados variam de 36 a 43 kDa.
• Em imunofluorescência/ICC, fixe as células com 4% de paraformaldeído e permeabilize com 0,1% de Triton X-100; recomenda-se a incubação com o anticorpo primário durante a noite a 4°C. Valide a especificidade da coloração com bloqueio por peptídeo ou silenciamento por siRNA.
• Para ELISA, este anticorpo policlonel pode ser usado como reagente de captura ou detecção; as condições ideais de revestimento e detecção devem ser determinadas empiricamente. Um par de anticorpos monoclonais correspondente pode melhorar a sensibilidade e especificidade.
• O anticorpo tem reatividade cruzada com MAPK1/MAPK3 de camundongo e rato; no entanto, realize uma validação específica para espécie no seu sistema experimental para confirmar a reatividade e a relação sinal-ruído.

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