Anticorpo monoclonal anti-MAPKAPK-2/MK2 para WB, ELISA - P49137

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da MAPKAPK-2/MK2

• A MAPKAPK-2/MK2 é uma serina/treonina-proteína quinase ativada por estresse, envolvida em múltiplos processos celulares, incluindo produção de citocinas, reorganização do citoesqueleto, migração celular, controle do ciclo celular, remodelamento da cromatina, resposta a danos no DNA e regulação transcricional.
• Após o estresse, ela é fosforilada e ativada pela p38-alfa/MAPK14, levando à fosforilação de substratos downstream em resíduos de serina dentro da sequência consenso Hyd-X-R-X(2)-S.
• Ela fosforila o HSF1, promovendo sua interação com a HSP90 e inibindo a homotrimerização, a ligação ao DNA e as atividades de transativação do HSF1, modulando assim a resposta ao choque térmico. Referências relacionadas: PMID:16278218
• Em resposta à irradiação UV, ela fosforila o CEP131, promovendo a ligação do CEP131 às proteínas 14-3-3 e inibindo a formação de novos satélites centriolares. Referências relacionadas: PMID:26616734
• Ela desempenha um papel fundamental na regulação pós-transcricional de citocinas inflamatórias, como TNF e IL6, por meio da fosforilação de proteínas ligantes de elementos ricos em AU (ARE) (por exemplo, TTP/ZFP36, ELAVL1, PABPC1), modulando assim a estabilidade e a tradução do mRNA.
• A MAPKAPK-2/MK2 contribui para o ponto de verificação tardio de danos ao DNA em G2/M, relocalizando-se do núcleo para o citoplasma após danos ao DNA e fosforilando HNRNPA0 e PARN, levando à estabilização do mRNA de GADD45A.
• Ela medeia a fosforilação de HSP27/HSPB1 em resposta ao estresse, causando a dissociação de grandes oligômeros de sHSP e comprometendo a atividade de chaperona.
• A localização subcelular é predominantemente citoplasmática e nuclear, e ela é expressa ubiquamente em todos os tecidos examinados.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 300–400 da MAPKAPK-2/MK2 humana, direcionando-se a uma região interna da proteína; certifique-se de que seu sistema de detecção seja compatível com a localização desse epítopo.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 46 kDa; considere utilizar lisados de controle positivo de células humanas, de camundongo ou de rato e inclua amostras submetidas e não submetidas a estresse para verificar a detecção dependente da ativação.
• Ao utilizar este anticorpo em ELISA, otimize as condições de revestimento e valide-o com proteína MAPKAPK-2 recombinante ou extratos celulares das espécies apropriadas para confirmar a especificidade.
• Dependendo do contexto do ensaio, esteja ciente de que modificações pós-traducionais (por exemplo, fosforilação) podem afetar a ligação do anticorpo; considere tratamentos com inibidores de fosfatase, se necessário.

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