Anticorpo Monoclonal Anti-MBD3 para WB, IHC-P, ELISA - O95983

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MBD3

• MBD3 (Proteína 3 do domínio de ligação a metil-CpG) é um componente chave do complexo NuRD (remodelação de nucleossomos e desacetilase), que medeia a remodelação da cromatina e a repressão transcricional. Referências relacionadas: PMID:12124384, PMID:16428440, PMID:28977666

• Ao contrário de outras proteínas do domínio de ligação a metil-CpG, a MBD3 não se liga diretamente ao DNA metilado, mas pode interagir com dinucleotídeos CpG não metilados, contribuindo para sua especificidade funcional. Referências relacionadas: PMID:24307175

• A MBD3 funciona como um repressor transcricional, desempenhando um papel crítico no silenciamento gênico através do recrutamento de histonas desacetilases e DNA metiltransferases. Referências relacionadas: PMID:10947852, PMID:18644863

• A proteína está localizada no núcleo e associada aos cromossomos, consistente com seu papel na dinâmica da cromatina.

• A MBD3 sofre modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e ubiquitinação, que podem regular sua atividade e interações.

• O splicing alternativo gera múltiplos isoformas da MBD3, potencialmente diversificando seus papéis funcionais em diferentes contextos celulares.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético da região N-terminal (aa 1-100), sugerindo um epítopo linear adequado para Western blot desnaturante e possivelmente IHC-P após recuperação antigênica apropriada.
• Para WB, considere otimizar a concentração do anticorpo na faixa de 1:500–1:2000 usando um lisado de controle positivo (ex.: HeLa, HEK293) e valide com amostras de nocaute ou tratadas com siRNA.
• Em IHC-P, a recuperação do epítopo com tampão citrato (pH 6.0) ou EDTA (pH 8.0) pode ser benéfica; realize um experimento piloto com tecidos positivos e negativos conhecidos.
• Para ELISA, recomenda-se o pareamento com um anticorpo de detecção adequado e o uso de um tampão de bloqueio compatível com o formato do ensaio; teste várias concentrações de antígeno de revestimento.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato foi relatada; no entanto, a validação de lote individual na espécie alvo é aconselhada para aplicações críticas.

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