Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-MBNL1 para WB - Q9NR56

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MBNL1

• O MBNL1 (Proteína semelhante à muscleblind 1, também conhecida como proteína de ligação ao RNA de expansão de tripletos) é uma proteína de ligação ao RNA que media a regulação do splicing alternativo de pré-mRNA.
• Atua como ativador ou repressor de splicing em alvos específicos de pré-mRNA; por exemplo, inibe a inclusão do éxon da troponina-T cardíaca (TNNT2), mas induz a inclusão do éxon do receptor de insulina (IR) no músculo e antagoniza a atividade de splicing da proteína CELF.
• O MBNL1 liga-se à sequência de consenso 5'-YGCU(U/G)Y-3' e a estruturas de haste-laço dentro dos RNAs alvo, incluindo o RNA de repetições CUG expandidas associado à distrofia miotônica.
• Juntamente com as proteínas de ligação ao RNA RBPMS e RBFOX2, o MBNL1 ativa eventos de splicing alternativo em células de músculo liso vascular (PubMed:37548402).
  Referências relacionadas: PMID:37548402
• A nível subcelular, o MBNL1 localiza-se no núcleo, citoplasma e grânulos citoplasmáticos.
• É altamente expresso no músculo cardíaco e esquelético, bem como durante a diferenciação de mioblastos, com menor expressão em nível proteico noutros tecidos, incluindo coração, cérebro, placenta, pulmão, fígado, rim e pâncreas.
• O MBNL1 é uma fosfoproteína de dedo de zinco; modificações pós-traducionais, incluindo a fosforilação, podem regular a sua atividade e localização.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio abrange os aminoácidos 1-382 do MBNL1 humano, uma região que engloba os domínios de ligação ao RNA de dedo de zinco tipo CCCH; este design visa provavelmente epítopos funcionais conservados importantes para a ligação ao RNA.
• Para o Western blot (WB), teste uma gama de diluições do anticorpo em lisados de tecidos musculares (por exemplo, músculo cardíaco ou esquelético), onde o MBNL1 é enriquecido; a banda prevista é cerca de 42 kDa, mas valide a migração real no seu sistema.
• A imuno-histoquímica (IHC-P) e a imunofluorescência (IF/ICC) podem exigir otimização da recuperação de antígenio e permeabilização; use tecidos de controlo positivos e negativos para confirmar a especificidade.
• Para ELISA, avalie a ligação à proteína ou peptídeo MBNL1 recombinante e otimize as condições de revestimento e deteção para o seu ensaio.
• Relata-se que o anticorpo tem reatividade cruzada com camundongo e rato; no entanto, valide sempre a reatividade na espécie relevante antes de aplicações quantitativas.

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