Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-MCM5 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P33992

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MCM5

• MCM5 (CDC46/P1-CDC46) é o fator de licenciamento de replicação de DNA e um componente central do complexo MCM2-7, a helicase replicativa eucariótica essencial para o início e alongamento da replicação de DNA uma vez por ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:40940420

• Juntamente com CDC45 e GINS, o MCM5 forma a helicase CDC45-MCM-GINS (CMG) que desenrola o DNA de fita dupla nas forquilhas de replicação, servindo como plataforma central para a montagem do replissomo. Referências relacionadas: PMID:16899510, PMID:32453425, PMID:34694004

• O anel MCM2-7 contém seis sítios ativos de ATPase formados nas interfaces das subunidades; o MCM5 contribui com um motivo de dedo de arginina conservado para o bolso de ligação de ATP da subunidade vizinha, com contribuições diferenciais para a atividade da helicase. Referências relacionadas: PMID:32453425

• O MCM5 localiza-se no núcleo e está ligado à cromatina de maneira dependente do ciclo celular, desempenhando um papel crítico no licenciamento de replicação e progressão da fase S.

• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e conjugação tipo ubiquitina, regulam a estabilidade e atividade do MCM5.

• O MCM5 é essencial para a estabilidade do genoma; mutações no gene MCM5 estão associadas à síndrome de Meier-Gorlin 8 (MGORS8) e outros distúrbios do desenvolvimento.

• O MCM5 é um membro da família MCM de helicases dependentes de ATP, compartilhando domínios conservados com MCM2-7, e é altamente expresso em células proliferativas.

• A proteína tem um peso molecular previsto de ~82 kDa e contém motivos de ligação de nucleotídeos críticos para sua função enzimática.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (proteína recombinante que abrange os aminoácidos 1–230 do MCM5 humano) visa a região N-terminal, que contém motivos conservados; reatividade cruzada com ortólogos de camundongo e rato foi observada. Para espécies não listadas, verifique a homologia da sequência antes do uso.
• Para Western blot (WB), considere uma diluição inicial de 1:500–1:2000 e use lisados nucleares ou de células inteiras de células proliferativas, onde o MCM5 é abundante. A banda prevista é de ~82 kDa; note que a fosforilação pode causar leves mudanças de mobilidade.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), o MCM5 exibe coloração nuclear dependente do ciclo celular; otimize as condições de fixação e permeabilização para preservar a proteína ligada à cromatina.
• Para imunoprecipitação (IP), o anticorpo pode enriquecer o MCM5 nativo e seu complexo MCM associado; valide a co-IP de outras subunidades MCM para confirmar a integridade do complexo.

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