Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-MDM2 para WB e ELISA - Q00987

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MDM2

• O MDM2 é uma ligase E3 de ubiquitinação de proteínas que medeia a ubiquitinação de p53/TP53, levando à sua degradação proteassomal. Inibe a parada do ciclo celular e a apoptose mediadas por p53 e p73, ligando-se diretamente aos seus domínios de ativação transcricional. Referências relacionadas: PMID:29681526
• O MDM2 também atua como uma ligase E3 de ubiquitinação em relação a si mesmo e ao ARRB1, permite a exportação nuclear de p53, promove a degradação independente de ubiquitina de RB1 e inibe a apoptose mediada por DAXX por meio de ubiquitinação e degradação.
• O MDM2 ubiquitina IGF1R e SNAI1, direcionando-os para degradação dependente do proteassoma. Referências relacionadas: PMID:12821780 PMID:15053880 PMID:15195100
• O MDM2 regula negativamente a respiração mitocondrial ao ligar-se ao NDUFS1, causando sua retenção citosólica, atividade reduzida do complexo I, aumento da produção de ROS e comprometimento com a apoptose. Referências relacionadas: PMID:30879903
• A proteína localiza-se no núcleo (nucleoplasma e nucléolo) e no citoplasma, consistente com seus papéis na regulação transcricional e sinalização citoplasmática.
• O MDM2 é expresso de forma onipresente, mas várias isoformas associadas ao câncer (Mdm2-A a Mdm2-G) são detectadas em tumais e ausentes em tecidos normais.
• Classificado como um proto-oncogene, o MDM2 é uma fosfoproteína com um domínio de dedo de zinco do tipo RING e participa de interações hospedeiro-vírus e da via de conjugação de ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 200–430 do MDM2 humano, cobrindo o domínio ácido, o dedo de zinco e as regiões do dedo RING conservadas em humanos, camundongos e ratos. Para Western blotting, considere o uso de lisados de linhagens de células cancerígenas com superexpressão de MDM2 (por exemplo, SJSA-1) como controles positivos e valide a detecção em tecidos de camundongo e rato com anticorpos secundários específicos da espécie apropriados.
• Uma banda principal de ~55 kDa é esperada no WB; espécies de peso molecular mais alto podem representar formas pós-traducionalmente modificadas (por exemplo, MDM2 ubiquitinado ou fosforilado). A inclusão de inibidores de fosfatases durante o preparo da amostra pode ajudar a preservar o peso molecular esperado.
• Para ELISA, teste o anticorpo tanto no formato de revestimento direto de antígeno quanto no formato sanduíche. Titulações preliminares em tabuleiro de xadrez (checkerboard) são recomendadas para otimizar a concentração de antígeno de revestimento e a concentração de trabalho do anticorpo.

CamelBio: Sua Ponte de Abastecimento Tudo-em-Um

A CamelBio capacita fabricantes de diagnósticos e laboratórios de pesquisa com uma solução de abastecimento tudo-em-um para matérias-primas de IVD premium, incluindo pares de anticorpos validados, antígenos purificados e reagentes auxiliares a granel. Este anticorpo anti-MDM2 apoia pesquisas sobre a via supressora de tumores p53 e a biologia do câncer. Além de anticorpos individuais, a CamelBio oferece abastecimento personalizado e consultoria técnica para agilizar o desenvolvimento de seus ensaios, do conceito à clínica.