Anticorpo Policlonais Anti-ME2 para WB, ELISA - P23368

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ME2

• ME2 (enzima málica dependente de NAD, mitocondrial) também é conhecida como ODS1 e enzima málica 2. É codificada pelo gene ME2 em humanos.
• Essa enzima catalisa a descarboxilação oxidativa do malato em piruvato, utilizando NAD+ como cofator. A reação é fundamental para ligar o ciclo do TCA ao metabolismo do piruvato e à produção de NADH.
• ME2 é uma enzima alostérica e requer íons metálicos bivalentes para atividade, tipicamente Mg2+ ou Mn2+, que facilitam a ligação ao substrato e a catálise.
• A proteína se localiza na matriz mitocondrial, onde atua no metabolismo do malato. Ela é importada para a mitocôndria por meio de um peptídeo de trânsito N-terminal que é clivado após a translocação.
• O splicing alternativo gera múltiplas variantes de transcripto, podendo gerar isoformas com propriedades regulatórias ou padrões de expressão distintos.
• As modificações pós-traducionais incluem a acetilação, que pode regular a atividade enzimática ou a estabilidade em resposta aos estados metabólicos celulares.
• ME2 é amplamente expressa, mas desempenha papéis especializados em tecidos com alta atividade mitocondrial, como fígado, coração e cérebro, onde contribui para o metabolismo de lipídios e aminoácidos.
• Palavras-chave da UniProt destacam suas características: estrutura 3D (dados estruturais disponíveis), acetilação, enzima alostérica, splicing alternativo, sequenciamento proteico direto, ligação a metais, mitocôndria, NAD, oxidorredutase e proteoma de referência.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi projetado contra a região C-terminal (aa 220-479) da ME2 humana. Essa região é distinta do peptídeo de trânsito N-terminal, portanto espera-se que o anticorpo reconheça a forma mitocondrial madura.
• Como anticorpo policlonal, ele pode detectar múltiplas isoformas provenientes de splicing alternativo. No Western blotting, a banda predominante é esperada em ~65 kDa, mas bandas adicionais podem aparecer dependendo da amostra e das condições utilizadas.
• Para WB, o uso de lisados enriquecidos em mitocôndrias ou tecidos com alto conteúdo mitocondrial (ex.: fígado, coração) pode melhorar a sensibilidade de detecção. Otimize as condições de bloqueio e lavagem para reduzir o ruído de fundo.
• No ELISA, o anticorpo pode ser utilizado para detecção direta ou indireta. Valide com a proteína ME2 recombinante ou lisados celulares para confirmar a especificidade e determinar a diluição ótima.
• A reatividade cruzada é declarada para a ME2 humana. Para outras espécies, verifique a homologia de sequência na região do imunógeno antes do uso, pois a reatividade não é garantida.

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