Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-MEK1 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q02750

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de MEK1

• MEK1 (MAP2K1) é uma quinase de dupla especificidade que fosforila resíduos de treonina e tirosina na alça de ativação de ERK1/2 (MAPK3/1), um passo crítico na cascata de sinalização MAPK/ERK.
• Atua a jusante de RAS-RAF1 e é essencial para a transmissão de sinais de receptores de superfície celular a efetores intracelulares, regulando processos como proliferação celular, diferenciação e sobrevivência.
• MEK1 ativa BRAF por meio de um mecanismo dependente de KSR1/KSR2, liberando a autoinibição de BRAF e aumentando a propagação do sinal. Referências relacionadas: PMID:29433126
• A localização subcelular abrange o citoplasma, centrossomo, polo do fuso mitótico, núcleo e membrana, refletindo seus papéis na mitose (fragmentação do Golgi), transporte endossomal e exportação nuclear (ex: PPARG).
• É amplamente expresso em tecidos humanos, com níveis notavelmente baixos no cérebro. Mutações associadas a doenças estão ligadas a cardiomiopatia, displasia ectodérmica e deficiência intelectual.
• Pertence à família das quinases MAP, que inclui MEK2 (MAP2K2), e é regulado por fosforilação e acetilação.
• A via MAPK/ERK, conduzida por MEK1, influencia a localização do receptor nuclear PPARG, integrando assim sinais metabólicos e apoptóticos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado foi um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 1–100 de MEK1 humano. O mapeamento de epítopos sugere o reconhecimento da região N-terminal, que é bem conservada; no entanto, a reatividade cruzada com MEK2 deve ser excluída experimentalmente se a especificidade for crítica.
• Para Western blotting, é esperada uma banda em torno de 43 kDa. Valide usando um lisado de controle positivo de linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato com expressão conhecida de MEK1 (ex: HeLa, NIH/3T3, PC12).
• Para imunofluorescência/ICC, otimize as condições de fixação/permeabilização, pois MEK1 pode ser citossólico, associado à membrana ou nuclear dependendo do estado celular.
• Para imunoprecipitação, use um tampão de lise suave para preservar as interações proteicas. Considere a ligação cruzada se desejar co-IP de componentes da via MAPK.
• Aplicações em ELISA podem empregar o anticorpo para detecção de MEK1 recombinante ou endógeno; faça a titulação e inclua controles adequados.

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