Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-MEK1 para WB, IP, ELISA - Q02750

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da MEK1

• MEK1 (MAP2K1) é uma proteína quinase de dupla especificidade que atua como nó crítico na cascata de transdução de sinal RAS-RAF-MEK-ERK, fosforilando resíduos de treonina e tirosina em ERK1/2 (MAPK3/MAPK1) para sua ativação completa.
• A proteína é amplamente expressa em todos os tecidos, com níveis notavelmente baixos no cérebro, e o splicing alternativo gera múltiplas isoformas (de palavras-chave do UniProt).
• MEK1 é ativada por fosforilação pelas quinases RAF (RAF1, BRAF, ARAF) em resposta a fatores de crescimento extracelulares, citocinas e hormônios que se ligam a receptores de superfície celular.
• MEK1 também exerce uma função de estrutura para promover a ativação de BRAF ao se ligar a KSR1 ou KSR2, liberando interações inibitórias e facilitando a dimerização de BRAF (PubMed:29433126). Referências relacionadas: PMID:29433126
• Subcelularmente, MEK1 se localiza no citoplasma, centrômero, polo do fuso mitótico, núcleo e membrana, o que é consistente com seus papéis na mitose, tráfego endossomal e fragmentação do Golgi.
• A quinase orquestra diversos processos celulares, incluindo proliferação, diferenciação, adesão, sobrevivência, metabolismo e reorganização do citoesqueleto, por meio da regulação mediada por ERK de fatores de transcrição e receptores nucleares (por exemplo, exportação nuclear de PPARG).
• Modificações pós-traducionais como acetilação e fosforilação modulam a atividade de MEK1, e variantes genéticas estão ligadas a cardiomiopatias, displasia ectodérmica e deficiência intelectual.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que cobre os aminoácidos 150–250 da MEK1 humana, uma região do domínio quinase altamente conservada entre humano, camundongo e rato, o que explica a reatividade cruzada reportada. Recomenda-se verificar a reatividade no seu sistema experimental específico.
• Para WB, espera-se uma banda próxima a 43 kDa. Monitore a migração no gel, pois MEK1 pode apresentar ligeiros deslocamentos após fosforilação ou outras modificações.
• Experimentos de IP podem ser realizados com protocolos padrão; otimize as proporções de anticorpo para lisado e as condições de incubação para o tipo de célula/tecido de seu interesse.
• Em ELISA, este anticorpo pode ser usado para captura direta de antígeno ou detecção de MEK1 recombinante. Inclua controles positivos e negativos apropriados para confirmar a especificidade.
• Dado o papel central de MEK1 na sinalização MAPK, certifique-se de que suas condições experimentais (por exemplo, privação de soro, estimulação) estejam bem controladas para interpretar os efeitos dependentes de ativação.

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