Anticorpo Monoclonal Anti-MEK1/MEK2 para WB, ELISA - Q02750/P36507

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MEK1/MEK2

• MEK1 (MAP2K1) e MEK2 (MAP2K2) são quinases de especificidade dupla intimamente relacionadas que servem como componentes essenciais da via de transdução de sinal da proteína quinase ativada por mitógenos (MAP).
• Na cascata MAPK/ERK, MEK1/2 são ativados pelas quinases RAF e subsequentemente fosforilam ERK1/2 nos resíduos de treonina e tirosina dentro de um motivo Thr-Glu-Tyr, levando à ativação do ERK.
• MEK1 demonstrou ativar BRAF de maneira dependente de KSR1 ou KSR2, liberando interações inibitórias intramoleculares e promovendo a dimerização do BRAF. Referências relacionadas: PMID:29433126
• A via media diversas funções biológicas, como crescimento celular, adesão, sobrevivência e diferenciação, principalmente através da regulação da transcrição, metabolismo e reorganizações do citoesqueleto.
• MEK1 exporta o receptor nuclear PPARG do núcleo, ligando a cascata à sinalização de receptores nucleares.
• A cascata MAPK/ERK também está envolvida na regulação da dinâmica endossomal, incluindo o processamento de lisossomos e a reciclagem de endossomos, e contribui para a fragmentação do Golgi durante a mitose.
• MEK1 é amplamente expresso em tecidos humanos, com níveis extremamente baixos no cérebro.
• Subcelularmente, MEK1 localiza-se no citoplasma, citoesqueleto, centrossomo, polo do fuso, núcleo e membrana.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação e acetilação, e o splicing alternativo dá origem a múltiplas isoformas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aminoácidos 1–360) do MEK1 humano, uma sequência altamente conservada no MEK2; isso sugere que o anticorpo pode reconhecer ambas as quinases. Valide a especificidade usando controles relevantes de knockout ou knockdown.
• Para Western blot, espere uma banda em torno de 44 kDa. Otimize as quantidades de carregamento e as diluições do anticorpo para seu tipo específico de amostra (por exemplo, lisados de células inteiras) e inclua controles positivos (por exemplo, HeLa, A431) e negativos apropriados.
• Este anticorpo é relatado como reativo cruzado com camundongo e rato. Confirme a reatividade em seu sistema experimental ao trabalhar com essas espécies.
• Para aplicações de ELISA, considere o emparelhamento com um anticorpo de detecção adequado para o desenvolvimento de ELISA sanduíche; a otimização do título pode ser necessária.
• Devido ao papel crítico do MEK1/2 na sinalização celular, o tratamento com ativadores/inibidores da via (por exemplo, fatores de crescimento, U0126) pode ser usado para modular a intensidade do sinal em seus ensaios.

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