Anticorpo Monoclonal Anti-MEK1/MEK2 para WB, IHC-P, ELISA - Q02750 / P36507

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de MEK1/MEK2

• MEK1 (MAP2K1) e MEK2 (MAP2K2) são proteínas quinases de dupla especificidade que atuam como componentes essenciais da cascata de sinalização MAPK/ERK, transmitindo sinais do RAS ativado para o ERK.
• Eles catalisam a fosforilação de resíduos de treonina e tirosina no motivo Thr-Glu-Tyr de MAPK3/ERK1 e MAPK1/ERK2, levando à sua ativação e à propagação de sinais downstream envolvidos no crescimento celular, adesão, sobrevivência e diferenciação.
• MEK1 ativa o BRAF de maneira dependente de KSR1 ou KSR2, aliviando interações intermoleculares inibitórias para promover a dimerização e ativação do BRAF. Referências relacionadas: PMID:29433126
• Subcelularmente, MEK1 é encontrado no citoplasma, incluindo os centrossomos e polos do fuso, e pode se deslocar para o núcleo e a membrana, refletindo seu papel dinâmico na transdução de sinais.
• MEK1 é amplamente expresso em todos os tecidos, com níveis particularmente baixos no cérebro.
• A proteína está sujeita a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, e contém domínios quinase que se ligam a ATP e substratos nucleotídicos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente à região dos aminoácidos 170–270 de MEK1 e MEK2 humanos, uma região provavelmente dentro do domínio quinase; recomenda-se verificar a especificidade do epítopo por competição com peptídeo ou mutagênese.
• Para Western blot, use lisados de células totais de linhas celulares humanas, de camundongo ou rato; uma banda específica próxima a 44 kDa é esperada. Otimize o bloqueio e a diluição do anticorpo para uma detecção com baixo nível de ruído de fundo.
• Para IHC-P, recomenda-se a recuperação de antígenos (por exemplo, tampão de citrato, pH 6,0) e a titulação do anticorpo primário em tecidos de controle positivo conhecidos (por exemplo, carcinoma de cólon).
• Para ELISA, o anticorpo pode ser utilizado como reagente de captura ou detecção; valide o pareamento com padrões de antígeno adequados e a reatividade cruzada com paralogos de MEK1/MEK2.
• Confirme a especificidade do alvo usando modelos de knockout ou knockdown de MEK1/MEK2 na espécie relevante.

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