Anti-MELK Anticorpo Policlonal de Coelho para WB e ELISA - Q14680

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do MELK

• A cinase maternal embrionária de alavanca de leucina (MELK), também conhecida como cinase pEg3 ou hPK38, é uma serina/treonina-proteína cinase codificada pelo gene MELK em humanos. Pertence a uma ampla família de cinases envolvidas na regulação do ciclo celular e apoptose.
• O MELK atua como um ativador da apoptose ao fosforilar e ativar a MAP3K5/ASK1, promovendo assim a morte celular programada. Também fosforila a BCL2L14, inibindo sua função pró-apoptótica, o que pode influenciar a carcinogênese mamária.
• Como um regulador chave do ciclo celular, o MELK medeia a fosforilação da CDC25B, promovendo sua localização nos centrossomos e polos do fuso durante a mitose, o que é essencial para a divisão celular adequada.
• O MELK é necessário para a proliferação de progenitores neurais multipotentes embrionários e pós-natais, destacando seu papel na autorenovação de células-tronco e neurogênese.
• A cinase também participa da regulação do splicing ao fosforilar a ZNF622 durante a mitose, inibindo a montagem do spliceossomo e redirecionando a ZNF622 para o núcleo.
• Estudos de localização subcelular indicam que o MELK está presente na membrana celular, embora sua atividade de cinase seja crítica em compartimentos citoplasmáticos e nucleares, dependendo do contexto celular.
• O perfil de expressão tecidual mostra que o MELK é proeminentemente expresso na placenta, rim, timo, testículo, ovário e intestino, com papéis potenciais na hematopoiese primitiva.
• Modificações pós-traducionais e características estruturais incluem domínios de ligação de ATP, cálcio e lipídios, e múltiplos sítios de fosforilação conforme catalogado na entrada de palavra-chave de fosfoproteína.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 412–651 do MELK humano, uma região que pode fornecer especificidade ao alvo; verifique o alinhamento da sequência entre espécies se a reatividade cruzada com camundongo ou rato for crítica.
• Para Western blot, espera-se a detecção de uma banda em aproximadamente 75 kDa. Considere usar faixas de diluição, como 1:500–1:2000, com controles positivos apropriados (por exemplo, linhagens celulares com expressão conhecida de MELK) e valide no seu sistema de amostras.
• No ELISA, o desempenho pode depender da conformação da proteína alvo e das condições de revestimento; considere usar a proteína MELK recombinante ou lisados celulares para determinar as diluições ideais do anticorpo.
• Como a reatividade cruzada é relatada para humano, camundongo e rato, os padrões de expressão específicos do tecido devem ser levados em conta ao selecionar controles positivos.

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