Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-MERS-CoV Spike RBD para WB, IF/ICC, ELISA - K9N5Q8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Glicoproteína Spike do MERS-CoV

• A glicoproteína spike (S) media a entrada viral ligando-se ao receptor do hospedeiro DPP4 (dipeptidil peptidase 4) e facilitando a fusão de membrana (UniProt K9N5Q8).
• É uma proteína de fusão viral de classe I; durante a fusão, suas regiões coiled-coil formam uma estrutura trímero-de-alças que impulsiona a aproximação e fusão das membranas.
• A proteína é clivada proteoliticamente nas subunidades S1 e S2; o domínio de ligação ao receptor (RBD) reside dentro de S1, enquanto o peptídeo de fusão em S2 é exposto após clivagem endossomal.
• Codificada pelo gene S, é um importante fator de virulência e o principal alvo de anticorpos neutralizantes (palavras-chave UniProt: Virulência, Proteína do envelope viral).
• Subcelularmente, localiza-se na membrana do virião, na membrana do compartimento intermediário retículo endoplasmático-Golgi do hospedeiro e na membrana da célula hospedeira (LOCALIZAÇÃO SUBCELULAR UniProt).
• Modificações pós-traducionais incluem N-glicosilação, formação de ligações dissulfeto e palmitoilação, que são críticas para o dobramento e função da proteína.
• A proteína spike de comprimento total tem um peso molecular previsto de aproximadamente 149 kDa (Peso Mol UniProt: 149.411 Da).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 18-725 da RBD) cobre o domínio de ligação ao receptor crítico para a interação com o DPP4 do hospedeiro; este anticorpo pode ser adequado para aplicações que estudam a ligação RBD–receptor.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 149 kDa; a glicosilação pode causar ligeiros deslocamentos de mobilidade. Considere usar controles de deglicosilação se bandas ambíguas aparecerem.
• Experimentos de imunofluorescência devem considerar a localização da proteína nas membranas intracelulares e na superfície celular; protocolos de permeabilização precisam ser otimizados para detecção intracelular.
• Em configurações de ELISA, a RBD da proteína Spike recombinante (ex.: YP_009047204.1) pode servir como controle positivo para titulação de anticorpos e teste de especificidade de ligação.

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